大鼠失神经骨骼肌血管退化机制及银杏叶提取物对其治疗作用的研究

摘要

第一部分、血管内皮生长因子及其受体胎肝激酶-1在大鼠失神经骨骼肌血管壁中的表达。 目的：观察血管内皮生长因子（VEGF）及其受体胎肝激酶-1（flk-1）在大鼠失神经骨骼肌血管壁中的表达变化规律。 方法：取成年雄性SD大鼠27只，其中健康对照组3只，实验组切断双侧坐骨神经后，在术后4h、8h、12h、24h、3d、5d、7d、14d取双侧腓肠肌组织，采用免疫组织化学方法和图象分析技术，对VEGF在肌肉中血管壁及flk-1在血管内皮的表达进行检测和分析。 结果：在正常大鼠腓肠肌，VEGF在血管壁有表达，flk-1只在血管内皮有表达。坐骨神经切断8h内VEGF在血管壁中的表达呈一过性的降低，随后至术后3d保持在低于健康对照组的低水平表达。术后3～14d表达逐渐增强，但14d时VEGF的表达量仍明显低于健康对照组。坐骨神经切断后flk-1在血管内皮的表达于术后0～12h呈现先升高而后降低的明显波动，术后24h～14d天表达逐渐升高。 结论：本实验揭示了早期失神经支配骨骼肌血管壁内VEGF及其受体胎肝激酶-1（flk-1）的表达变化规律，为进一步研究其血管退化机制及从微循环角度治疗失神经肌萎缩奠定了基础。 第二部分、银杏叶提取物对失神经骨骼肌血管的保护作用及其机制的探讨。 目的：研究银杏叶提取物对大鼠失神经腓肠肌血管的保护作用及其机制。 方法：取成年龄雄性SD大鼠15只，空白对照组3只，对照组6只，实验组和对照组切断双侧坐骨神经后每天分别给予Egb 100 mg/(kg·d)、等体积生理盐水灌胃，于术后1w、3w分别取双侧腓肠肌组织，采用免疫组织化学方法和图象分析技术，测定大鼠失神经腓肠肌的毛细血管数－肌纤维数比值(CFR)，并对血管内皮生长因子（VEGF）及其受体胎肝激酶-1（flk-1）以及热休克蛋白70（HSP70）在血管壁的表达进行检测和分析。 结果：空白对照组VEGF、flk-1及HSP70在血管壁均见表达，flk-1只在血管内皮有表达。坐骨神经切断后1W及3W时，实验组CFR高于对照组；实验组和对照组VEGF及flk-1在血管壁中的表达均较空白对照组低，且实验组低于对照组；实验组和对照组HSP70在血管壁中的表达均较正常对照组增强，且实验组表达量明显高于对照组。 结论：本实验证实了银杏叶提取物对失神经骨骼肌血管s的保护作用；并认为保护作用的机制不是通过促进VEGF及其受体flk-1的表达实现，而是与HSP70的表达增加有关。