TNF-α对TP酶的调节及其对氟铁龙抑制大肠癌细胞作用的研究

摘要

目的：结肠癌发病率逐年升高，已经成为危害人类生存的重要疾病之一。目前结肠癌的治疗是以手术、化疗及免疫治疗等为主的综合治疗。氟尿嘧啶是治疗结肠癌的有效药物，但有诸多副作用。氟铁龙及卡培他滨是一类新型的氟尿嘧啶前体药，具有口服吸收迅速，在肿瘤内优先转化为5-FU的特点，与直接静脉应用5-FU相比，具有更强的肿瘤选择性和更少、更轻的副作用。 胸苷磷酸化酶(TP酶)是氟尿嘧啶前体药物转化过程中发挥作用的关键限速酶，能催化5-FU前体药物转化为有细胞毒作用的5-FU。由于TP酶在多种肿瘤组织中表达水平均高于周围正常组织，因此5-FU前体药物可以优先在肿瘤内部转化为5-FU。本课题通过应用肿瘤坏死因子α上调大肠癌细胞中的TP酶水平，从而增加氟尿嘧啶前体药物的化疗敏感性。 方法： 1．体外培养人大肠癌细胞株SW620、Lovo、Colo205及HT-29。 2．应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测肿瘤组织中TP酶蛋白水平。 3．以肿瘤坏死因子α作用于肿瘤细胞，诱导TP酶水平上调，观察TP酶上调与肿瘤坏死因子α剂量以及作用时间的关系。 4．用MTT法和苔盼兰染色法检测肿瘤坏死因子α诱导后的肿瘤细胞对5-FU前体药物的化疗敏感性变化。 5．应用SPSS13.0统计学软件对数据进行统计学处理。 结论： 1．大肠癌细胞株SW620中未检测到TP酶蛋白表达，Lovo细胞、Colo205及HT-29细胞株TP酶蛋白表达存在显著差异，说明肿瘤细胞中TP表达存在细胞间的差异。 2．TNF-α能够上调原本低表达肿瘤细胞中的TP酶蛋白，对TP高表达的肿瘤细胞无上调作用；TNF-α对肿瘤细胞的上调作用表现出细胞依赖性、剂量依赖性、时间依赖性。 3．v0细胞中TP酶蛋白上调后对5-FU前体药物(氟铁龙)的化疗敏感性明显增加，对5-FU的化疗敏感性无影响。提示小剂量TNF-α能起到为5-FU前体药化疗增效的作用。

目录

摘要

第一部分结肠癌细胞中胸苷磷酸化酶表达及肿瘤坏死因子对其调节的体外研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

第二部分肿瘤坏死因子联合氟铁龙抑制大肠癌细胞株生长的实验研究

前言

材料与方法

结果

附图

附表

讨论

结论

参考文献

综述 胸苷磷酸化酶与肿瘤的关系及其临床应用

致谢

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