中药复方含药血清对人前列腺癌细胞系PC-3增殖与凋亡影响的体外实验研究

摘要

背景与目的: 近年来我国前列腺癌的发病率增长迅速，且患者在确诊时多已为局部晚期或已发生肿瘤转移。内分泌治疗是目前晚期前列腺癌的首选治疗方法，但几乎所有病人最终都将转化为激素非依赖。一旦转化为激素非依赖，治疗十分棘手。以多西他赛为基础的化疗可延长激素非依赖性前列腺癌患者的生存时间，但总体生存时间仍然较短，且副作用大。故很多前列腺癌患者开始寻求替代疗法。中草药治疗是最常用的替代疗法之一。PC-SPES曾是应用最广泛的中药复方，多个临床试验也证实了它的疗效。中药治疗前列腺癌有效且毒副作用小，故研发对激素非依赖性前列腺癌治疗有效的中药复方十分必要，具有重要的经济价值及社会价值。本实验以临床常用的抗肿瘤中药组成复方，用血清药理学方法检测各复方含药血清对人激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3增殖、细胞周期分布及凋亡的影响，初步筛选出在体外对激素非依赖性前列腺癌细胞有抑制增殖或诱导凋亡作用的中药复方，为下一步的动物荷瘤实验提供依据，并最终用于治疗临床激素非依赖性前列腺癌患者。 方法: 以临床常用的中药组成三个复方，分别用三种中药复方水煎剂及等量生理盐水对成年雄性去势SD大鼠灌胃，每天两次，共五天。在末次给药后60～90min时间段内取下腔静脉血制成含药大鼠血清，同时制作空白对照大鼠血清。用含药和空白对照大鼠血清在体外培养激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3，用MTT法检测培养4hr、24hr、48hr、72hr的细胞存活率；用流式细胞仪测定培养72hr的细胞周期分布；对培养72hr的细胞行Hoechst染色观察细胞凋亡情况。比较细胞存活率、细胞周期分布及凋亡情况的差异。 结果: 中药一组的细胞存活率最低，且随着培养时间的增加而持续降低；中药二组的细胞存活率较中药一组的高，但显著低于对照组，其细胞存活率在48hr时达到最低；中药三组的细胞存活率与对照组比较无显著差异。中药一组和中药二组的S期细胞比例显著低于对照组的S期细胞比例，而G0／G1期细胞比例显著高于对照组，G2／M期细胞比例与对照组比较无显著差异；中药三组的细胞各周期分布比例与对照组比较均无显著差异。中药一组的细胞中凋亡细胞明显增多，比例约为30％；中药二组中的凋亡细胞较中药一组的少，但显著多于对照组，比例约为10％；中药三组中凋亡细胞很少，与对照组相似。 结论: 中药复方一和中药复方二在体外有显著的抑制激素非依赖性前列腺癌细胞PC-3增殖和诱导PC-3细胞凋亡的作用，可进一步用于动物荷瘤实验证实疗效；中药复方三在体外无明显的抑制PC-3细胞增殖或诱导PC-3细胞凋亡的作用，不建议应用于激素非依赖性前列腺癌的治疗。

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