硒对高氟所致大鼠血液氧化应激损伤的影响研究

摘要

氟是一种非金属元素，也是人体必需的一种微量元素。近年来，氟对血液等非骨相组织的毒性作用逐渐被人们所重视。硒也是机体必需的一种微量元素，适量的硒可促进氟的排泄，能拮抗氟的脂质过氧化作用，但不同硒氟饲喂方式能否拮抗高氟所致大鼠血液脂质过氧化作用及其机制研究尚未见深入报道。本研究通过让初断乳雄性大鼠自由饮用50mg/L的氟化钠水溶液，分别加入三个浓度(0.5、1.5、4.5mg/L)的亚硒酸钠水溶液，并结合不同饲喂方式染毒6个月；运用动物行为学、生物化学、细胞生物学、分子生物学、毒理学等方法，研究了硒对氟中毒雄性大鼠的一般中毒症状、血液生化指标、血清部分金属元素、血液脂质过氧化作用及对外周血淋巴细胞DNA的影响，现将主要研究成果总结如下： 1.过量摄入氟可诱导大鼠血液的氧化损伤，表现为导致红细胞及免疫细胞各项指标发生改变；导致血清中钙、镁、铁、铜、锌、锰含量下降；引起血清MDA含量增高、GSH-Px活性下降、T-AOC水平下降；使大鼠淋巴细胞DNA的迁移率和尾长均显著升高(P＜0.05)。 2.本研究结果表明：与高氟组比较，大鼠长期摄入硒能拮抗氟致红细胞数和平均红细胞血红蛋白含量的下降；低硒可导致大鼠的红细胞数显著减少(P＜0.05)；高硒能使平均红细胞血红蛋白含量显著下降(P＜0.05)。中硒可使各实验组的白细胞总数、淋巴细胞数、单核细胞数、粒细胞数较高氟组显著上升，硒(4.5mg/L)氟同喂及先氟后硒(4.5mg/L)组亦可使大鼠粒细胞总数较高氟组显著上升(P＜0.05)。1.5mg/L的硒溶液可促进免疫细胞的功能。不同饲喂方式对氟中毒大鼠红细胞的影响基本无差异(P＞0.05)；除粒细胞总数外，不同饲喂方式对氟中毒大鼠免疫细胞的影响基本无差异(P＞0.05)。 3.各加硒组大鼠血清中钙含量较高氟组均无显著升高(P＞0.05)。硒(1.5mg/L)氟同喂组和先氟后硒(1.5mg/L)组的镁含量较高氟组有显著升高(P＞0.05)。硒(1.5mg/L)氟同喂组和先氟后硒(1.5mg/L)组的钙、镁含量最高；而在先硒后氟组中，钙、镁水平随着硒浓度的上升而下降。这可能是由于长期摄入中、高剂量硒溶液，导致硒在血清中蓄积，与氟元素表现为协同毒害作用。 染氟可以使大鼠血清中微量元素铁、铜、锰、锌水平显著减少(P＜0.05)，各加硒组对氟致大鼠血清微量元素含量下降的影响存在较大差异，氟、硒在体内与其它微量元素之间关系非常复杂，，但机制尚不清楚，有待进一步探讨。 4.与高氟组比较，三种饲喂方式的中硒组均能显著拮抗氟致大鼠血液抗氧化功能的下降(P＜0.05)。实验结果表明，在大鼠生长发育过程中，补充中等剂量的硒能拮抗氟致大鼠血清的氧化损伤。先硒(1.5mg/L)后氟组抗氧化功能改善优于其他饲喂组。 5.与对照组比较，除硒(1.5mg/L)氟同喂组外，各组DNA拖尾率及迁移长度均显著上升(P＜0.05)；与高氟组比较，D、E、G、J组的DNA拖尾率及迁移长度均显著下降(P＜0.05)。实验结果表明，大鼠给予Se(1.5mg/L)能明显降低中毒大鼠淋巴细胞DNA的迁移率和尾长(P＜0.05)，部分地减轻氟诱导的氧化损伤，在保护淋巴细胞DNA及其损伤修复方面具有一定的作用。三种饲喂方式中，硒(1.5mg/L)氟同喂组拮抗氟致大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤的效果最佳。 上述结果表明，Se(0.5mg/L)和Se(4.5mg/L)组可在一定程度上预防、拮抗和治疗饮水型氟中毒，Se(1.5mg/L)组拮抗氟致大鼠血液脂质过氧化作用的效果最佳。三种饲喂方式拮抗氟致大鼠血液脂质过氧化作用的效应不同，硒(1.5mg/L)氟同喂和先氟后硒(1.5mg/L)组拮抗氟诱导的血清中的镁水平降低的效果最佳；先硒后氟组对大鼠血清抗氧化酶系及脂质过氧化物的改善作用优于其他两种饲喂组；硒氟同喂组拮抗氟致大鼠外周血淋巴细胞DNA的损伤的效果最佳。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

一.引言

二.文献综述 氟中毒的研究概括及硒拮抗氟中毒的研究进展

(一)氟中毒的研究概况

1.氟化物的基本性质

2.氟化物的动物毒性效应

3.氟中毒机理的研究探讨

4.小结

(二)硒拮抗氟中毒的研究概况

1.硒元素的基本性质

2.硒拮抗氟中毒的基本概况

3.硒拮抗氟中毒的机制研究

(三)小结

三、材料与方法

(一)主要仪器与试剂

(二)实验动物及染毒分组

1.实验动物

2.染毒剂量及方法

(三)实验方法

1.一般状况观察

2.大鼠血液常规指标的测定

3.大鼠血清中部分金属元素含量的测定

4.大鼠血液中氧自由基代谢水平及相关酶活性的测定

5.大鼠血液淋巴细胞DNA损伤的测定

6.统计方法

四、实验结果与分析

(一)一般状况观察结果

(二)硒对氟中毒大鼠血液生理生化指标的影响

1.硒对氟中毒大鼠红细胞的影响

2.硒对氟中毒大鼠白细胞的影响

(三)硒对氟中毒大鼠血清部分金属元素含量的影响

1.硒对氟中毒大鼠血清中宏量元素含量的影响

2.硒对氟中毒大鼠血清中部分微量元素含量的影响

(四)硒对氟中毒大鼠血液氧化损伤的影响

1.硒对氟中毒大鼠血清GSH-Px活力的影响

2.硒对氟中毒大鼠血清T-AOC水平的影响

3.硒对氟中毒大鼠血清MDA含量的影响

(五)硒对氟中毒大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

1.硒对氟中毒大鼠血液淋巴细胞DNA拖尾率的影响

2.硒对氟中毒大鼠血液淋巴细胞DNA迁移长度的影响

五、讨论

(一)饲养过程中动物一般体征观察及体重变化情况

(二)硒对氟中毒大鼠血细胞的影响

1.硒对氟中毒大鼠红细胞的影响

2.硒对氟中毒大鼠白细胞的影响

(二)硒对氟中毒大鼠血清部分金属元素含量的影响

1.硒对氟中毒大鼠血清钙、镁含量的影响

1.硒对氟中毒大鼠血清中部分微量元素含量的影响

(三)硒对氟中毒大鼠血液氧化损伤的影响

1.硒对氟中毒大鼠血清GSH-Px活力的影响

2.硒对氟中毒大鼠血清T-AOC水平的影响

3.硒对氟中毒大鼠血清MDA含量的影响

(五)硒对氟中毒大鼠外周血淋巴细胞DNA损伤的影响

六、结论

参考文献

致谢

攻读学位期间发表的学术论文