携带mda-7/IL-24的双靶向溶瘤腺病毒抗癌作用以及PcG蛋白在肿瘤细胞增殖中作用的研究

摘要

论文中对携带mda-7/IL-24的双靶向溶瘤腺病毒抗癌作用作了一定研究，同时也初步研究了PcG蛋白在肿瘤细胞增殖和肿瘤发生发展中的作用。 溶瘤腺病毒(肿瘤特异性增殖腺病毒)是一类充满希望的抗肿瘤药物，它能特异性地在肿瘤细胞中复制、增殖，从而杀死肿瘤细胞。利用溶瘤腺病毒携带治疗基因既保留了病毒杀伤肿瘤细胞的能力，同时随着病毒在肿瘤细胞中的复制，也大大增加了治疗基因在癌细胞中的表达量，同时发挥病毒治疗和基因治疗的双重功能。 Mda-7/IL-24是一种分泌型糖蛋白，具有广泛的抗肿瘤的作用，能促进肿瘤细胞调亡、具有潜在的旁观者效应、提高放射疗效、诱导免疫调节反应和抑制肿瘤血管生成的作用。为了达到治疗肝癌的目的，本实验构建了内源表达mda-7/IL-24基因的双靶向溶瘤腺病毒AdCN205-IL-24。本论文通过体外、体内实验评估其抗肿瘤效果，观察其是否能够更特异地在肿瘤中复制，是否能更高效地表达外源基因，从而更好地发挥病毒治疗和基因治疗的双重抗肿瘤效果。实验结果显示，AdCN205-IL-24具有明显且特异的抗肿瘤能力，在体外和体内都表现出显著的抗癌效果，为今后应用于更完善的溶瘤腺病毒靶向治疗系统奠定基础。 近年来，人们发现PcG(Polycombgroup)蛋白参与多种生物功能，包括干细胞的命运决定、分化以及肿瘤发育。许多研究发现作为PeG蛋白成员的EZH2和BMI1在许多肿瘤组织(包括肝癌)中都高表达。PcG的深入研究不仅有助于肝癌的机理研究，还给肝癌的治疗提供了更多的靶标。本课题通过siRNA对EZH2、BMI1抑制作用，考察了EZH2和BMI1对肿瘤细胞增殖的作用。并通过质粒携带EZH2和BMI1基因，进一步确定了EZH2及BMI1过表达对肿瘤细胞增殖的作用。两方面实验结果均表明，EZH2和BMI1对至少肝脏肿瘤细胞系具有促进细胞增殖的作用，将可以进一步利用携带靶向EZH2和BMI1的shRNA的质粒或病毒载体来稳定并长期地抑制肿瘤细胞中EZH2和BMI1蛋白的表达，从而达到治疗肝癌的目的。更多的对BMI1与肿瘤干细胞关系的研究，将有助于更明确地将BMI1基因作为肿瘤干细胞地靶标，从而实现从根本上去除癌灶。

目录

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论文说明：缩略语

声明

第一部分携带mda-7/IL-24的双靶向溶瘤腺病毒抗癌作用研究

1.1引言

1.1.1溶瘤腺病毒应用于肿瘤基因治疗研究进展

1.1.2实验方案设计

1.2 实验材料与方法

1.2.1实验材料

1.2.2 实验方法

1.3实验结果

1.3.1 AdCN205-IL-24在体外能够选择性地在肿瘤细胞中复制

1.3.2 外源基因选择性地在肿瘤细胞中高量表达

1.3.3 AdCN205-IL-24具有选择性杀死肿瘤细胞的能力

1.3.4 AdCN205-IL-24明显抑制荷瘤小鼠肿瘤生长

1.4讨论

第二部分PcG蛋白在肿瘤细胞增殖中作用的研究

2.1引言

2.1.1PcG蛋白与肿瘤关系研究进展

2.1.2实验方案设计

2.2实验材料与方法

2.2.1实验材料

2.2.2实验方法

2.3实验结果

2.3.1 EZH2和BMI1在肝癌细胞株中高表达，

2.3.2 RNA干扰EZH2和BMI1抑制肿瘤细胞增殖

2.3.3 重组质粒pcDNA3.0-EZH2和pcDNA3.0-BMI1的构建

2.3.4 EZH2和BMI1过表达促进肿瘤细胞的增殖

2.4讨论

结论

参考文献

致谢

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