Survivin调控的肿瘤特异性增殖腺病毒携带TSLC1基因抑制肝癌细胞生长的研究

摘要

肿瘤的靶向基因-病毒治疗是近几年兴起的肿瘤新疗法,人们对其攻克癌症难题寄予了极高的期望。溶瘤腺病毒是目前运用最多的靶向基因-病毒治疗载体。为增强腺病毒的靶向性,我们对其进行改造,利用肿瘤特异性Survivin(sp)启动子代替病毒E1A基因的启动子,并删除病毒E1855KD蛋白,构建出肿瘤特异性增殖腺病毒载体Ad.sp-E1A-E1B(△55),既可双重靶向肿瘤细胞,又提高了其对正常细胞的安全性。治疗基因的选择是肿瘤的靶向基因-病毒治疗取得成功的关键之一。为增强溶瘤腺病毒对肿瘤细胞的杀伤达到更佳效果,我们利用TSLC1(tumor suppressorin lung cancer1)基因作为肿瘤治疗基因进行研究。TSLC1是近几年新发现的一个肿瘤抑制因子,在多数肿瘤细胞中被抑制表达,它在肿瘤发生、细胞粘附、免疫监视、细胞运动及信号转导等方面都有重要作用。有研究显示TSLC1可能通过免疫调节、抑制肿瘤细胞的侵袭和转移、抑制细胞生长周期和诱导细胞凋亡等方面杀伤肿瘤细胞。因此,TSLC1基因有望成为一个潜在的肿瘤治疗基因。
　　 本研究将TSLC1基因插入到腺病毒载体Ad.sp-E1A-E1B(△55),构建了重组病毒Ad.sp-ElA-E1B(△55)-TSLC1,研究了该重组病毒对肝癌细胞生长的体内外抑制效应,并初步探索了其杀伤肿瘤细胞的机理及对正常细胞安全性的评价。细胞实验结果表明,重组病毒对肝癌细胞株Huh7、PLC、Bel-7404具有很好的杀伤效果,而对正常细胞影响很小。肝癌细胞Huh7荷瘤裸鼠体内抑癌实验表明,重组病毒能有效抑制裸鼠肿瘤生长并能提高患癌小鼠的生存率。研究发现,TSLC1基因可能通过影响体内caspase通路和Wnt通路诱导细胞凋亡,同时通过增强细胞黏附性抑制肿瘤的侵袭和转移,通过抑制肿瘤细胞生长周期导致细胞凋亡。总之,构建的重组病毒.Ad.sp-E1A-E1B(△55)-TSLC1具有较好的抑制肿瘤细胞生长效应,且安全性较高,TSLC1可以作为治疗基因用于肿瘤的基因-病毒治疗。