声明
摘要
缩略语
第一章 文献综述
1 凝集素的概论
1.1 凝集素的分类
1.2 凝集素的生物特性
1.3 凝集素的应用
2 毕赤酵母表达系统概论
2.1 毕赤酵母表达系统的优势
2.2 毕赤酵母表达系统的载体和菌株
2.3 毕赤酵母外源基因表达优化策略
3 人源SUMO融合系统促蛋白可溶表达
3.1 融合表达系统的简述
3.2 SUMO融合表达系统
4 本研究的目的和意义
第二章 人源SUMO促半夏凝集素的表达纯化及活性研究
前言
1 实验材料和方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 实验结果
2.1 三叶半夏凝集C端结构域基因序列的获得
2.2 载体pET-32-SUMO-P-D2的鉴定
2.3 SUMO-D2融合蛋白表达以及分离纯化
2.4 SUMO-D2融合蛋白酶切以及P-D2分离纯化
2.5 P-D2蛋白凝血活性实验以及糖结合特异性实验
2.6 P-D2蛋白体外抗肿瘤活性实验
2.7 Hoechst 33342染色观察肿瘤细胞凋亡现象
3 讨论
4 本章小结
第三章 毕赤酵母表达三叶半夏凝集素及其活性研究
前言
1.材料与方法
1.1 实验材料
1.2 实验方法
2 实验结果
2.1 载体pPIC9k-P-D1的构建与鉴定
2.2 阳性SMD1168菌株的鉴定与表达纯化
2.3 P-D1蛋白的凝血活性以及糖特异性实验
2.4 重组蛋白P-D1抗真菌活性实验
2.5 P-D1体外抗肿瘤活性实验
2.6 P-D1诱导Bel-7404细胞凋亡现象观察实验
3 讨论
4 本章小结
结论
参考文献
硕士期间发表论文
致谢