携带GSDME基因的溶瘤腺病毒构建及其抑制肝癌细胞生长的研究

目录

声明

摘要

缩略词

1绪论

1．1前言

1．3溶瘤腺病毒GD55概述

1．4细胞焦亡

1．5 GSDME基因

1．6盐酸阿霉素

1．7实验目的和意义

2实验材料和方法

2．1实验材料

2．1．1实验试剂

2．1．2实验仪器设备

2．1．3细胞株

2．1．4实验主要溶液的配制

2．1．4引物的设计与合成

2．2实验方法

2．2．1分子克隆

2．2．2细胞培养

2．2．3体内实验

2．3统计学分析

3结果与分析

3．1．2 pGD55-GSDME重组质粒构建与鉴定

3．1．3腺病毒基因组的构建与鉴定

3．1．4溶瘤腺病毒野毒鉴定

3．2检测GSDME基因在各种细胞和组织中的表达

3．2．1 qRT-PCR检测GSDME基因在各种细胞中的表达

3．2．2 Western blot检测GSDME的表达水平

3．2．3免疫组化检测GSDME的表达情况

3．3溶瘤腺病毒GD55-GSDME联合Dox的体外杀伤效果

3．3．1 MTT检测细胞存活率

3．3．2 Dox的安全剂量使用

3．3．3细胞焦亡形态的观察

3．3．4溶瘤腺病毒GD55-GSDME和Dox的协同作用

3．3．5 LDH检测细胞坏死

3．3．6结晶紫检测细胞存活率

3．3．7 Hoechst33342检测细胞凋亡

3．3．8 Western blot检测相关蛋白含量的变化

3．3．9流式检测细胞凋亡

3．4溶瘤腺病毒GD55-GSDME联合Dox的体内杀伤效果

4讨论与展望

参考文献

硕士研究生期间的研究成果

致谢