一种新的丝氨酸蛋白酶-SNC19（ST14）基因编码蛋白的生物特性的研究

摘要

为进一步研究SNC19（ST14）蛋白的生物特性,以及其在肿瘤转移中的可能作用,该实验在核酸水平的研究基础上设计：1,将SNC19（ST14）基因克隆到原核表达质粒,表达纯化SNC19（ST14）-GST融合蛋白;2,用SNC19（ST14）-GST融合蛋白免疫小鼠,按杂交瘤技术制备SNC19（ST14）蛋白单克隆抗体;3,利用生物信息学方法进行SNC19（ST14）蛋白的结构预测和功能分析;4,在mRNA水平用RT-PCR的方法研究在正常大肠黏膜及相应肿瘤组织中表达;在蛋白水平应用免疫组织化学方法研究政党消化道与相庆肿瘤组织表达分布情况,并研究在其他肿瘤中表达的情况,同时研究SNC19蛋白与其相关蛋白HAI-1蛋白在组织表达中的关系;5,用PCR-DNA序列分析的方法比较正常大肠黏膜及相应肿瘤组织中SNC19（ST14）基因组DNA外显子序列的差异分析SNC19（ST14）基因突变情况.1.SNC19原核表达质粒的构建及融合蛋白的表达;2.SNC19单克隆抗体的制备和生物学特性鉴定;3.SNC19蛋白结构预测和功能分析;4.SNC19及其相关蛋白HAI-1在一些正常及肿瘤组织中表达分布的研究;5.SNC19基因突变情况的研究.结论：1.原核表达SNC19基因cDNAR的部分ORF成功,并获得纯化的SNC19-GST融合蛋白.2.成功制备抗SNC19单克隆抗体ZMG9,有较高的特异性和敏感性.3.SNC19蛋白是一种新的Ⅱ型跨膜丝氨酸蛋白酶,其结构上的特点显示该蛋白与细胞表面发生的蛋白水解有关.4.在大肠正常黏膜组织与大肠癌组织中的未发现有SNC19基因突变.5.SNC19蛋白与消化道上皮细胞松解脱落有关.6.SNC19蛋白与促分化有关,可以作为一种分化指标.7.SNC19蛋白与HAI-1蛋白存在共表达现象,可能是一种新的细胞膜表面蛋白水解酶系统的成员.8.SNC19和HAI-1之间的平衡的破坏可能与肿瘤发生有关.

目录

一、中文摘要

二、英文摘要

三、论文部分

(一)前言

参考文献

(二)第一部分SNC19原核表达质粒的构建及融合蛋白的表达

1.材料和方法

2.结果

3讨论

4结论

5参考文献及图表

(三)第二部分snc19单克隆抗体的制备和生物学特性鉴定

1.材料和方法

2.结果

3讨论

4结论

5.参考文献及图表

(四)第三部分SNC19蛋白结构预测和功能分析

1.材料和方法

2.结果

3讨论

4结论

5.参考文献及图表

(五)第四部分SNC19及其相关蛋白HAI-1在一些正常及肿瘤组织中表达分布的研究

1.材料和方法

2.结果

3.讨论

4结论

5.参考文献及图表

(六)第五部分SNC19基因突变情况的研究

1.材料和方法

2.结果

3讨论

4结论

5.图表

(七)总结

参考文献及附图

四、综述部分

(一)SNC19(ST14)——一种新的丝氨酸蛋白酶的研究进展

1.SNC19基因及其编码的丝氨酸蛋白酶的结构组成

2.SNC19基因及其编码的丝氨酸蛋白酶在各类组织中分布

3.SNC19编码蛋白的功能研究

参考文献

(二)肝细胞生长因子的研究进展

五、致谢