抗人端粒重复序列结合因子（hTRF1）单克隆抗体的鉴定以及在急性白血病和肾脏肿瘤中的应用研究

摘要

端粒是真核生物线形染色体末端高度保守的重复核苷酸序列和蛋白质的复合体,由一段串联重复的富G(鸟嘌呤碱基)DNA序列和相关蛋白组成.端粒对于染色体的稳定非常重要.端粒酶是一种核糖核蛋白酶,能利用自身RNA为膜板合成端粒DNA,弥补随着细胞有丝分裂逐渐缩短的端粒长度.大量研究证实,超过85﹪的恶性肿瘤细胞,其端粒酶活性高于正常组织.端粒、端粒调控蛋白与恶性肿瘤密切相关,但机理尚不清楚.该研究在已获得的抗TRF1<'33-277>单克隆抗体基础上,对该单抗进行鉴定及生物学特性的研究,并进一步应用该单抗对急性白血病和肾脏肿瘤中TRF1的蛋白质表达水平进行检测,旨在探讨TRF1与恶性肿瘤的诊断、治疗与预后的关系,为今后TRF1检测技术应用于临床提供新的理论与实验依据.该文在抗TRF1<'33-277>单抗制备的基础上,对端粒酶负调控因子TRF1在蛋白质水平进行了研究.以ELISA间接法、定性Western-blot和免疫组化完成了对抗TRF1<'33-277>单抗的鉴定;建立了两种检测组织中TRF1蛋白质表达的方法—免疫组化和定量Western-blot;研究TRF1蛋白质在急性白血病的表达水平及其与端粒酶活性的关系,同时对肾脏肿瘤中TRF1的表达水平也进行了相应的研究.结果揭示,所制备的抗TRF1<'33-277>单抗为高度特异性的单抗;TRF1蛋白表达于骨髓等多种组织中,在胞浆中呈均匀分布,说明其表达具有一定的普遍性;TRF1蛋白在肿瘤与正常组织的表达程度不一,与正常骨髓相比较,TRF1蛋白质在急性白血病中低表达,治疗缓解后TRF1表达随之增高,但与正常骨髓细胞比较,差异仍有统计学意义,同时TRF1蛋白质表达水平与端粒酶活性呈负相关;与正常肾脏组织相比,TRF1在肾脏癌组织中呈低表达,并与肿瘤的恶性程度呈负相关.提示TRF1可能与恶性肿瘤的发生发展等过程有关,为今后进一步开展肿瘤与端粒酶、端粒调控蛋白相互关系的研究,为TRF1检测技术应用于临床提供新的理论与实验依据.

目录

前言

抗人端粒重复序列结合因子(TRF133-277)单克隆抗体鉴定及TRF1蛋白质生物学的初步特性研究

材料与方法

结果

讨论

参考文献及图表

人端粒重复序列结合因子(hTRF1)蛋白质在急性白血病中的表达水平与端粒酶活性关系的研究

材料与方法

结果

讨论

参考文献及图表

人端粒重复序列结合因子(hTRF1)在肾脏肿瘤中的表达水平的研究

材料与方法

结果

讨论

参考文献及图表

总结

综述：端粒、端粒酶调控机制的研究进展

参考文献

综述：造血干细胞移植相关性口腔粘膜炎的研究现状及治疗进展

参考文献

在读期间发表的文章及参加的科研项目

致谢