转CryIAc和CpTi基因水稻抗虫性比较及高羊茅植株再生

摘要

自1987年首次报道获得转基因抗虫植株以来,已有40多种不同类型的抗虫基因用于各类作物的遗传转化,其中转Bt基因抗虫玉米、马铃薯、棉花已进入商业应用,并产生了明显的经济效益.近年来,农杆菌介导转基因研究在单子叶植物中取得很大进展,但依然存在基因型依赖性强等问题,继续探索不同品种的转基固体系仍有必要.该论文对培矮64S的组织培养及转化过程中的多个影响因子作了研究,初步建立较完善的农杆菌介导培矮64S转化体系.同时将2个杀虫机理和抗虫谱不同的抗虫基因CryIAc和CpTi导入粳稻品种

目录

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致谢

第一章农杆菌遗传转化单子叶植物的研究进展

1.1农杆菌介导的遗传转化机理

1.1.1农杆菌种类及Ti质粒

1.1.2T-DNA的分泌系统

1.2.农杆菌介导单子叶植物转基因的研究

1.2.1农杆菌介导单子叶植物转化的限制因子

1.3转基因水稻中标记基因的去除

1.4农杆菌介导法转基因技术的优势及展望

参考文献：

第二章作物抗虫转基因的研究

2.1抗虫基因工程发展的必要性

2.2抗虫基因种类

2.2.1 Bt基因的研究和应用

2.2.2蛋白酶抑制剂基因研究和应用

2.2.3植物外源凝集素基因及其它抗虫基因

2.3抗虫转基因作物的安全性

2.3.1生态安全性分析

2.3.2转基因作物的食用安全性分析

参考文献：

第三章草坪草生物技术研究进展

3.1组织培养和原生质体培养

3.2遗传转化

3.3筛选标记基因

3.4转基因植株

3.5安全性讨论

参考文献：

第四章农杆菌介导培矮64S的研究

4.1材料与方法

4.1.1品种、菌株、质粒和试剂

4.1.2愈伤组织诱导

4.1.3双元载体导入农杆菌

4.1.4农杆菌培养和共培养

4.1.5 GUS检测方法

4.1.6抗性愈伤组织的筛选和植株再生

4.1.7水稻基因组DNA的小量提取

4.2结果与分析

4.2.1不同培养基对培矮64S愈伤诱导的效果

4.2.2光照对培矮64S愈伤诱导及瞬间表达的影响

4.2.3培养基对GUS瞬间表达的影响

4.2.4共培养时间对培矮64S转基因瞬间表达的影响

4.2.5筛选压对抗性愈伤产生的影响

4.2.6分化培养基的筛选

4.3培矮64S转基因植株PCR分析及GUS检测

4.4讨论

参考文献：

第5章转CryIAc、CpTi基因水稻对纵卷叶螟抗性比较的研究

5.1材料与方法

5.1.1品种、菌株、质粒

5.1.2农杆菌转化方法

5.1.3水稻基因组DNA及mRNA的提取

5.1.4 T3代对纵卷叶螟的抗性

5.1.5 T3代对大螟的抗性鉴定

5.1.6 T3代农艺性状考查

5.2结果与分析

5.2.1转基因水稻植株的PCR鉴定

5.2.2转基因水稻植株的RT-PCR鉴定

5.2.3 T3代对纵卷叶螟自然条件下的抗性

5.2.4 T3代对纵卷叶螟接虫条件下的抗性

5.2.5 T3代对大螟的抗性

5.3 T3代农艺性状

5.4讨论

参考文献：

第六章高羊茅组织培养的研究

6.1激素对高羊茅愈伤组织诱导及其分化的影响

6.1.1材料与方法

6.1.2结果与分析

6.1.3.讨论

6.2植物调节剂在高羊茅组织培养中的应用

6.2.1材料与方法

6.2.2结果与分析

6.2.3讨论

参考文献：

附表A已经命名的Bt蛋白基因(2003.3)

附录B表目录

附录C图目录