人骨髓间充质干细胞对外周血T淋巴细胞体外活化影响的研究

摘要

该实验以植物血凝素(PHA)刺激人外周血T淋巴细胞作为反应体系,观察人BM-MSCs对人外周血T淋巴细胞体外活化的影响,进一步明确人骨髓间充质干细胞是否具有抑制淋巴细胞对刺激的反应性的作用,并通过T淋巴细胞凋亡检测及细胞培养上清液细胞因子检测的方法,初步探讨其作用的可能机理.本研究首先通过Ficoll密度梯度离心法,得到低密度的单个核细胞,然后利用MSCs的粘附特性,分离和纯化MSCs.骨髓单个核细胞接种于培养瓶后,2-3h细胞开始贴壁,24h后贴壁细胞数目不再增加.48h更换培养液后,贴壁细胞开始分裂增殖,部分区域形成细胞团簇,细胞呈现梭形外观.2周后,细胞融合成单层,梭形突起变长,排列有明显方向性,呈漩涡状、网状、辐射状.培养至2-3周贴壁细胞接近80％-90％融合.传代培养后,传代细胞在12h内完全贴壁,细胞重新变为梭形细胞,与成纤维细胞形态相似.细胞传代后生长迅速,增殖快,大约7-10天达到完全融合.综上所述,该实验结果表明①人BM-MSCs能抑制T淋巴细胞对PHA刺激的反应性,不受MHC分子限制,其抑制能力与MSCs和单个核细胞比例呈正相关.②人BM-MSCs的免疫抑制作用和外周血T淋巴细胞凋亡无关.③人BM-MSCs的免疫抑制作用和细胞培养上清液中TGF-β1浓度无关.④人BM-MSCs的免疫抑制作用和细胞培养上清液中IL-10的浓度呈正相关.

目录

前 言

材料和方法

实验结果

讨 论

小 结

参考文献

综述肠道急性移植物抗宿主病研究进展

致 谢