奶牛乳腺组织体外培养体系的建立及MET对其酪蛋白α基因表达的影响

摘要

本课题以泌乳奶牛乳腺组织为研究材料,在泌乳奶牛乳腺组织的体外培养方法选择(试验一)和用于测定奶牛乳腺组织酪蛋白α<,sl>基因mRNA表达量RT-PCR法的构建(试验二)进行了研究;并利用建立的方法,研究、探讨了体外培养的奶牛乳腺组织对泌乳素刺激的应答性(试验三)与蛋氨酸对体外培养奶牛乳腺组织酪蛋白α<,sl>基因表达的影响(试验四).1.泌乳奶牛乳腺组织体外培养方法的建立(试验一)2.酪蛋白α<,sl>基因及持家基因GAPDH的扩增、序列分析及RT-PCR条件探讨(试验二)3.半定量 RT-PCR法评定体外培养的奶牛乳腺组织对泌乳素的应答性(试验三)4.半定量RT-PCR法评定蛋氨酸对奶牛乳腺细胞酪蛋白α<,sl>基因表达的影响(试验四)

目录

致谢

摘要

图表一览表

1.前言

1.1引言

1.2乳蛋白的营养价值与激素调节

1.2.1乳蛋白的构成及其营养价值

1.2.2乳蛋白的生物合成与调节

1.3营养因素对乳蛋白分泌的影响

1.3.1奶牛限制性必需氨基酸的研究现状

1.3.2限制性必需氨基酸对奶牛乳蛋白分泌的影响

1.4有待研究的内容

1.5本研究的目的与内容

1.5.1研究目的

1.5.2研究内容

2.奶牛乳腺组织培养体外培养模型的选择

2.1材料和方法

2.1.1材料

2.1.2方法

2.2统计方法

2.3结果

2.3.1.旋转培养法

2.3.2贴壁培养法

2.4讨论

2.4.1培养体系的建立

2.4.2培养添加物的作用

2.4.3建立乳腺组织培养体系的意义

3.酪蛋白αs1基因及持家基因GAPDHRT-PCR条件探讨与序列分析

3.1材料和方法

3.1.1试验材料

3.1.2试验方法

3.2结果

3.2.1总RNA提取液RNA纯度

3.2.2酪蛋白αs1与GAPDH基因扩增及序列分析

3.2.3 PCR产物电泳结果

3.2.4测序结果

3.3讨论

3.3.1定量RT-PCR法的构建

3.3.2酪蛋白αs1与GAPDH基因扩增及序列分析

4.半定量RT-PCR法评定体外培养奶牛乳腺组织对泌乳素的应答性

4.1材料和方法

4.1.1试验材料

4.1.2方法

4.2统计方法

4.3结果

4.3.1旋转培养奶牛乳腺组织对不同浓度泌乳素的应答性

4.3.2旋转培养奶牛乳腺组织对泌乳素的应答性

4.4讨论

5.半定量RT-PCR法评定蛋氨酸对奶牛乳腺组织酪蛋白αs1基因表达的影响

5.1材料和方法

5.1.1试验材料

5.1.2方法

5.2统计方法

5.3结果

5.4讨论

6.提示

参考文献

附录硕士期间发表论文清单