细胞钙超载模型的建立及在中药钙拮抗药效评价中的应用

摘要

本论文通过选择不同的激动剂KCl、ATP、Ang Ⅱ建立血管平滑肌细胞钙超载模型,激动剂KCl、ATP、H<,2>O<,2>建立人脐静脉内皮细胞钙超载模型,应用激光扫描共聚焦显微技术以及荧光染色技术对钙超载模型形成过程进行检测及对其结果进行定量分析.其中,KCl激活细胞膜上电压依赖型钙通道,ATP可激活细胞内质网/肌质网上IP<,3>受体通道,H<,2>O<,2>和Angiotensin Ⅱ(Ang Ⅱ)可同时激活细胞膜上受体通道和细胞肌质网上IP<,3>受体通道导致细胞钙超载.应用建立的钙超载模型分别对具有降压效果的黄芪甲甙和保护内皮细胞作用的葛根素两种药物的钙拮抗药效进行了评价,结果表明黄芪甲甙对KCl、ATP、Ang Ⅱ诱导的平滑肌细胞钙超载的抑制率分别为84.8％、47.2％和34.2％,能有效拮抗平滑肌细胞钙超载;葛根素对KCl、ATP、H<,2>O<,2>诱导的内皮细胞钙超载的抑制率分别为78.2％、56.5％和72.2％,对内皮细胞钙超载具有显著的拮抗效果.

目录

文摘

英文文摘

第一章绪论

§1.1钙离子的生理意义

1.1.1细胞膜上钙通道

1.1.2钙库上的钙通道

§1.2细胞钙超载与血管疾病

1.2.1细胞钙超载与细胞损伤

1.2.2细胞钙超载与血管疾病的病理

§1.3钙拮抗剂的药理作用

1.3.1对心脏的作用

1.3.2对血管的作用

1.3.3对血管平滑肌细胞和内皮细胞的作用

§1.4钙超载模型及检测方法

1.4.1钙超载模型

1.4.2细胞内游离钙离子测定方法

1.4.3常用光学检测仪器

§1.5本课题研究目的和主要内容

第二章应用激光扫描共聚焦显微技术建立细胞钙超载模型

§2.1细胞钙超载模型激动剂的选择

§2.2激光扫描共聚焦显微技术

2.2.1激光扫描共聚焦显微镜成像原理

2.2.2 LSCM 510的基本配置

§2.3平滑肌细胞钙超载模型的建立

2.3.1平滑肌细胞的培养

2.3.2平滑肌细胞钙超载过程的检测

2.3.3实验结果

§2.4人脐静脉内皮细胞钙超载模型的建立

2.4.1人脐静脉内皮细胞的培养

2.4.2人脐静脉内皮细胞钙超载过程的检测

2.4.3实验结果

第三章细胞钙超载模型在中药钙拮抗药效评价中的应用

§3.1黄芪甲甙对平滑肌细胞钙超载的影响

3.1.1实验方法

3.1.2实验结果

§3.2葛根素对人脐静脉内皮细胞钙超载的影响

3.2.1实验方法

3.2.2实验结果

第四章分析与讨论

§4.1细胞钙超载模型的建立

§4.2钙超载模型在钙拮抗剂筛选中的应用

第五章总结与展望

参考文献

相关论文发表情况

致谢