C2C12骨骼肌细胞中胰岛素刺激下Ca的作用研究

摘要

本文对C2C12骨骼肌细胞中胰岛素刺激下Ca<'2+>的作用进行了研究。文章建立了小鼠C2C12肌原细胞的诱导分化模型，应用激光共聚焦显微技术结合特异性的细胞内荧光标记技术，对成熟骨骼肌细胞中胰岛素刺激下Ca2+的变化情况及其作用和来源进行了研究，具体分为两部分： 1、应用血清饥饿的方法，成功建立了小鼠C2C12肌原细胞系的诱导分化模型，并对分化成熟的骨骼肌细胞进行了形态及结构的鉴定。 2、以成熟的C2C12骨骼肌细胞作为实验对象，探讨了胰岛素信号转导通路中Ca<'2+>的存在作用以及其作用来源。通过应用各种阻断剂分析，得出在胰岛素刺激引起的葡萄糖转运中Ca<'2+>主要通过膜上L-型钙通道进入胞内，与肌浆网钙库关系不明显。

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第一章绪论

§1.1骨骼肌与糖尿病

§1.1.1正常骨骼肌纤维简介

§1.1.2糖尿病简介

§1.1.3骨骼肌组织中胰岛素信号分子

§1.1.4糖尿病骨骼肌的形态学改变与分子生物学机制

§1.2骨骼肌细胞内钙信号

§1.2.1细胞膜上的钙运输系统

§1.2.2胞内钙通道与钙库

§1.2.3 Ca2+的缓冲系统

§1.3钙通信与胰岛素信号转导

§1.4本论文研究的任务及目标

第二章小鼠肌原细胞系C2C12分化模型的建立

§2.1前言

§2.2材料与方法

§2.2.1实验材料

§2.2.2 C2C12细胞系的培养

§2.2.3 C2C12细胞系的分化及鉴定

§2.2.4 C2C12细胞系的条件的选择

§2.3实验结果

§2.3.1 C2C12肌原细胞系的培养

§2.3.2 C2C12肌原细胞系的分化

§2.4分析和讨论

第三章Ca2+在骨骼肌细胞胰岛素刺激下葡萄糖转运过程中的作用机制

§3.1前言

§3.2材料与方法

§3.2.1实验材料

§3.2.2胰岛素刺激下骨骼肌细胞内Ca2+变化的检测

§3.3实验结果

§3.4分析与讨论

第四章总结与展望

§4.1研究工作总结

§4.2进一步的工作展望

参考文献

致谢