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肿瘤靶向性脂质体SOD的制备和靶向分析

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目录

论文说明:Abbreviations Used

摘要

第一章文献综述

§前言

§1 liposome的组成、结构和种类

§1.1 liposome的组成和结构

§1.2 Liposome种类

§2 Liposome的制备

§2.1磷脂薄膜水合法(thin film method)

§2.2脱水—再水合法

§2.3前脂质体法(Proliposome method)

§2.4逆相蒸发法(reverse phase evaporation techniques)

§2.5硫酸铵梯度法

§2.6超临界反相蒸发法

§2.7注入法

§3 Liposome与细胞的作用机制

§3.1脂质体与细胞之间的融合作用

§3.2细胞对脂质体的胞吞作用

§4.脂质体在体内的稳定性及RES对脂质体的快速清除

§4.1组织的解剖学屏障对脂质体吸收的影响

§4.2脂质体的稳定性及RES对脂质体的快速清除

§5脂质体的靶向性

§5.1被动靶向性

§5.2脂质体粒径对靶向性的影响

§5.3免疫脂质体(immuno-liposomes)

§5.4受体脂质体

§5.5磁性脂质体(magnetic liposomes or magnetoliposomes)

§5.6特殊靶向脂质体

§6长循环脂质体

§6.1长循环脂质体的发展

§6.2长循环脂质体的物理特性(Physical properties)

§6.3长循环脂质体的药物动力学特征

References

第二章 脂质体的制备以及特性分析

§2.1引言

§2.2试验部分

§2.2.1试剂与材料

§2.2.2主要仪器设备

§2.2.3磁流体的制备

§2.2.4逆相蒸发法(reverse phase evaporation techniques)

§2.2.5薄膜水合法(thin film method)

§2.2.6纳米脂质体

§2.2.7前脂质体法(Proliposome method)

§2.2.8脂质体包封率的测定

§2.3结果与分析

§2.3.1纳米磁流体的制备

§2.3.2脂质体的制备

§2.3.3 Cu,ZN-SOD的包封率测试

§2.3.4脂质体的稳定性

§2.3.5磁性脂质体在强磁场作用下的反应

§2.4结论

References

第三章 SOD磁靶向脂质体在细胞中的分布以及对细胞氧化压力的影响

§3.1引言

§3.2试验部分

§3.2.1试剂和材料

§3.2.2主要仪器设备

§3.2.3 FITC标记Cu,ZN-SOD

§3.2.4双荧光标记SOD-MAG-LIP的制备

§3.2.5细胞培养

§3.2.6脂质体载体模型的检验

§3.2.7 SOD-MAG-LIP对HEPG2细胞氧化压力的影响

§3.2.8 SOD-MAG-LIP作用细胞后细胞的活性测定

§3.2.9 SOD-MAG-LIP在体外与细胞作用的效果分析

§3.3结果与分析

§3.3.1 FITC-Rhodamine B标记脂质体孵育SPC-A-1细胞检验脂质体载体模型

§3.3.2 SOD-MAG-LIP对HepG2细胞氧化压力的影响

§3.3.3 SOD-MAG-LIP的抗肿瘤细胞能力分析

§3.3.4 SOD磁靶向脂质体在磁场中对细胞作用的效果分析

§3.4结论

References

第四章SOD磁靶向脂质体活体靶向性分析

§4.1引言

§4.2试验部分

§4.2.1试剂和材料

§4.2.2主要仪器设备

§4.2.3 FITC-Rh B-MGA-LIP的制备

§4.2.4强磁场诱导下磁性脂质体在小鼠两肾脏中的分布不平衡性

§4.3结果与分析

§4.4结论

References

第五章 结语与展望

References

致谢

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摘要

本论文将脂质体技术和磁靶向技术结合起来,在体外细胞水平研究Cu,Zn-SOD磁靶向脂质体运载体系与HepG2、SPC-A-1细胞的相互作用,对细胞氧化压力的影响以及对肿瘤细胞的抑制杀伤作用;并在小鼠活体水平对SOD磁性脂质体在磁场诱导下对靶组织的靶向能力进行了评估。我们用改进的前脂质体法和我们研究室开发的纳米脂质休法制备的SOD磁性脂质体对SOD的包封率分别达到了47.9±2.1%和42.7±1.6%。SOD磁靶向脂质体能够借助细胞的内吞作用将SOD运载进入胞内,并且这种磁性脂质体-细胞相互作用受人工磁场诱导的影响,人工磁场能大大增高我们所制备的磁性脂质体与肿瘤细胞的相互作用,增强了细胞对脂质体的摄取。通过超氧阴离子探针DHE对O<,2>水平的检测,发现SOD磁性脂质体能够有效的清除胞内O<,2><'->,降低细胞的氧化压力。通过MTT实验证明,SOD磁性脂质体对HepG2和SPC-A-1细胞有较好的抑制和杀伤作用,IC<,50>分别是30U/ml和20U/ml。 在活体水平试验中,我们将Rh B/FITC双荧光标记SOD磁性脂质体通过尾静脉给药的方式注射小鼠,并通过磁场诱导,以此检验磁性脂质体的靶向性。将靶组织和对照组织制成冷冻切片,观测其中的荧光分布,发现受到磁场诱导的组织切片的荧光较未受诱导的组织切片的荧光显著得多,这表明在磁场的诱导下,磁性脂质体能够通过体内循环系统靶向进入靶组织,并在靶组织中积累下来。

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