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致谢
第1章植物无融合生殖研究进展
1.1什么是无融合生殖?
1.2无融合生殖现象的普遍性
1.3无融合生殖的分类
1.4无融合生殖在农业生产上潜在的应用价值
1.5无融合生殖性状的研究方法
1.6绿毛山柳菊属植物,无孢子生殖和自发配子体单性生殖的模式植物
1.7兼性无融合生殖植物的不同后代类型
1.8无融合生殖植物细胞类型同一性的早期线索
1.9有性生殖和无融合生殖途径间的分子学联系
1.10来自胚珠其它组织的信号
1.11无融合生殖现象的遗传学基础
1.12为什么配子体无融合生殖植物都是多倍体?
1.13无融合生殖基因的识别
1.14诱导无融合生殖突变体策略
1.15作物中导入无融合生殖性状的发展前景
参考文献
第2章MSP1编码蛋白配体的识别、时空表达及功能研究
2.1前言
2.2材料与方法
2.2.1材料的种植和取样
2.2.2显微镜操作
2.2.3 BLAST和系统进化树的构建
2.2.4 RNA提取、RT-PCR和离体转录
2.2.5 RNA原位杂交
2.2.6酵母双杂交(Y2H)和双分子荧光互补分析(BiFC)
2.2.7水稻OsTDL1A基因的RNA干扰
2.3结果
2.3.1水稻中存在着两个拟南芥TPD1同源基因:OsTDL1A和OsTDL1B
2.3.2 OsTDL1A,OsTDL1B同MSP1在部分组织中共表达
2.3.3 MSP1,OsTDL1A和OsTDL1B在幼穗中的转录部位研究
2.3.4 OsTDL1A与MSP1富亮氨酸重复区域存在直接的互作关系
2.3.5 RNA干扰抑制OsTDL1A在幼穗中的转录水平
2.3.6 OsTDL1A RNAi植株胚珠内产生与msp1突变体相同的表现型
2.4讨论
2.4.1大孢子母细胞和无孢子生殖起始细胞的比较
2.4.2 OsTDL1A干扰植株能恢复雄性可育
2.4.3 MSL1基因的识别
2.4.4 OsTDL1A同MSP1基因富亮氨酸重复区域在植物体内互作
2.4.5水稻无孢子生殖的诱导
附加信息
参考文献
第3章MSP1基因起始密码子上游序列及其激酶域调控功能的研究
3.1引言
3.2材料与方法
3.2.1小量基因组DNA的提取
3.2.2日本晴和7个野生稻MSP1基因启动子的克隆
3.2.3 Southern杂交
3.2.4 MSP1转录起始位点的识别
3.2.5双向电泳
3.3结果
3.3.1聚合酶链式反应(PCR)扩增假定的启动子区域
3.3.2 MSP1假定启动子区域的克隆及Southern杂交验证
3.3.3不同基因组野生稻MSP1假定启动子区域的序列比较分析
3.3.4 MSP1上游基因转录起始位点的确定
3.3.5 MSP1纯合突变体及野生型的蛋白表达分析
3.4讨论
3.4.1不同基因组野生稻msp1启动子区域的进化
3.4.2 MSP1基因结构的预测
3.4.3野生型和突变体蛋白表达的差异
参考文献
第4章水稻腈水解酶基因的识别、表达和细胞学定位
4.1引言
4.2材料与方法
4.2.1材料
4.2.2 BLAST搜索和DNA序列鉴定
4.2.3系统进化树的构建和基因结构画图
4.2.4 RNA提取和RT-PCR
4.3结果
4.3.1水稻腈水解酶基因的识别
4.3.2水稻腈水解酶基因的结构分析
4.3.3水稻腈水解酶基因的表达分析
4.3.4水稻腈水解酶基因mRNA的细胞学定位:RNA原位杂交
4.4讨论
参考文献
附录