水稻和番茄S-亚硝基谷胱甘肽还原酶基因的克隆鉴定与生化功能分析

摘要

本文对水稻和番茄S-亚硝基谷胱甘肽还原酶基因的克隆鉴定与生化功能进行了分析。结果表明，表达OsGSNOR1或LeGSNOR1的sfal菌株恢复了对GSNO的不敏感性，表现出野生型特性，而表达空载体的sfal转化子则对GSNO敏感，因此克隆的OsGSNOR1和LeGSNOR1基因编码S-亚硝基谷胱甘肽还原酶。为了研究S-亚硝基谷胱甘肽还原酶在植物抗病性中的作用，将OsGSNOR1和LeGSNOR1基因克隆进植物表达载体，转化拟南芥，通过抗性筛选获得了表达上述基因的转基因拟南芥植株。

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论文说明：图表目录

致谢

1文献综述：一氧化氮在植物抗病反应信号途径中的作用及其机制

1.1植物的抗病信号传导途径

1.2 NO是植物抗病信号途径的重要信号分子

1.3植物中GSNO的作用

1.4本研究的目的与内容

2材料与方法

2.1供试拟南芥和各类培养基

2.2植物种植与处理

2.3植物总RNA提取

2.4水稻和番茄GSNOR基因的克隆

2.5测序及生物信息学分析

2.6双元表达载体的构建

2.7农杆菌转化

2.8拟南芥转化以及转基因植株的筛选

2.9酵母转化

2.10 GSNOR酶活性测定

2.11酵母生长速率测定

3.结果与分析

3.1水稻和番茄S-亚硝基谷胱甘肽还原酶基因的克隆

3.2 OsGSNOR1和LeGSNOR1蛋白特征

3.4 OsGSNOR1和LeGSNOR1基因双元表达载体的鉴定

3.5酵母生长速率测定结果与分析

3.6酵母粗蛋白GSNOR活性测定与分析

3.7过量表达OsGSNOR1、LeGSNOR1转基因拟南芥植株

4.小结和讨论

附图

5.参考文献