RNAi介导IGF-1R基因沉默对肺癌细胞A549生长与侵袭性影响的体内外实验研究

摘要

全文分为三部分： 第一部分:靶向IGF-1R的siRNA表达载体的构建及其对肺癌细胞A549 IGF-1R表达的抑制效应 目的:构建靶向IGF-1R的siRNA表达载体,并进一步研究其对人肺癌细胞A549 IGF-1R表达的抑制效应. 方法:利用pENTR/U6质粒构建IGF-1R特异性siRNA表达载体和对照组表达载体,并用PCR电泳鉴定.IGF-1R特异性siRNA表达载体以脂质体法转染人肺腺癌细胞A549 48小时,用RT-PCR、western blot法分别检测IGF-1R mRNA和蛋白的表达水平. 结论:IGF-1R特异性siRNA能够有效地抑制肺癌细胞A549 IGF-1R的表达. 第二部分:RNAi介导IGF-1R基因沉默对肺癌细胞A549增殖与凋亡的影响 目的:研究RNAi介导IGF-1R基因沉默对肺癌细胞A549增殖、凋亡及相关信号转导通路的影响. 方法:用靶向IGF-1R的siRNA质粒表达载体转染肺癌细胞A549 Oh、24h、48h、72h,用MTT法检测A549细胞的增殖活性;IGF-1R特异性siRNA表达载体转染A549细胞48h,基因组DNA琼脂糖凝胶电泳(DNA ladder)检测凋亡特征性

目录

缩写词(A-Z)(Abbreviations)

实验设备

常用试剂配方

技术路线图

第一部分：靶向IGF-1R的siRNA表达载体的构建及其对肺癌细胞A549IGF-1R表达的抑制效应

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第二部分：RNAi介导IGF-1R基因沉默对肺癌细胞A549增殖及凋亡的影响

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

第三部分：RNAi介导IGF-1R基因沉默对肺癌细胞侵袭性及转移的影响

前言

材料与方法

结果

讨论

参考文献

全文小结

综述IGF-1R的研究进展

攻读博士学位期间的工作

致谢