共轭亚油酸(CLA)对大黄鱼脂肪代谢、免疫、肉品质及PPAR基因表达的影响

摘要

共轭亚油酸(CLA)是具有许多重要生理功能的天然不饱和脂肪酸之一。人体及动物实验表明，它具有降低脂肪、抗癌、抗动脉粥样硬化、增强肌体免疫能力、改善骨组织代谢等多种独特的生理功能。本研究在大黄鱼日粮中添加了不同水平的共轭亚油酸，探讨了共轭亚油酸对大黄鱼生长、脂肪代谢、免疫性能及对大黄鱼肌肉品质的影响，并对大黄鱼肝脏中的PPARa和PPARγ基因进行了克隆与表达，从分子水平上阐述了共轭亚油酸影响大黄鱼脂肪代谢的作用机制。主要研究内容和结果如下：1．日粮CLA水平对大黄鱼生长性能和脂肪代谢的影响
　　 本试验研究了日粮CLA对大黄鱼生长性能、体成分、脂质组成、脂肪代谢酶活性和脂肪酸成分的影响。在基础日粮中用CLA代替鱼油，添加水平分别为0％、1％、2％和4％(试验D1—D4组)。经过10周的饲喂，结果表明：饲喂1％的CLA能够提高大黄鱼的特定生长率(SGR)和肥满度(CF)，饲喂高含量(2％和4％)的CLA则降低了SGR，但是四个试验组之间的差异不显著(P＞0.05)。日粮中添加CLA对大黄鱼的饵料系数(FCR)没有影响，但是肝体比(HSI)和脏体比(VSI)均有所提高，各处理组(D2—D4)之间差异也不显著(P＞0.05)。与对照组(D1)相比，大黄鱼鱼体的水分、粗蛋白和灰分均有所增加，粗脂肪含量有所下降，但是差异不显著(P＞0.05)。随着日粮中CLA水平的增加，大黄鱼肝脏和肌肉中的脂肪含量也有所降低(P＞0.05)。
　　 与D1组相比，CLA能够显著降低血清和肝脏中甘油三酯(TG)的含量(P＜0.05)。血清中的TG含量随着CLA含量的增加显著降低，D2组与D3和D4组相比差异显著(P＜0.05)。在肝脏中，CLA处理组之间差异不显著(P＞0.05)．与此同时，CLA能够显著增加血清和肝脏中游离脂肪酸(FFA)的含量(P＜0.05)。在血清和肝脏中，D4组的FFA含量最高，并且与D1和D2组相比差异显著(P＜0.05)。随着日粮中CLA含量的增加，血清中胆固醇(CHO)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)含量也随着降低，CLA处理组与D1组相比有显著差异(P＜0.05)。血清中高密度脂蛋白胆固醇(HDL—C)的含量随着CLA含量的增加而增加。CLA处理组与D1组相比差异显著(P＜0.05)，但是D2、D3和D4组之间无显著差异(P＞0.05)．
　　 日粮中添加CLA能够显著降低大黄鱼血清和肝脏中肝脂酶(HL)和脂蛋白脂酶(LPL)的活性。在血清和肝脏中，D2、D3和D4组的HL和LPL活性与D1相比差异显著(P＜0.05)，而且D2组与D3和D4相比也具有显著性差异(P＜0.05)。此外，CLA对大黄鱼血清和肝脏中葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G6PD)、脂肪合成酶(FAS)和苹果酸酶(ME)的活性有着不同程度的影响，1％CLA对血清和肝脏中的G6PD活性没有显著影响(P＞0.05)．但是高含量的CLA(2％和4％)能够显著降低血清和肝脏中的G6PD活性，并且与D1组相比差异显著(P＜0.05)。CLA能够显著降低大黄鱼血清中的脂肪酶(FAS)活性，与D1相比，D4组的FAS活性降低了16％，且差异显著(P＜0.05)。与此同时，CLA也能够降低大黄鱼肝脏中的FAS活性，但D1—D4组间差异不显著(P＞0.05)．大黄鱼血清和肝脏中苹果酸酶(ME)的活性随着日粮中CLA含量的增加而降低．在血清中，D3和D4组ME活性与D1相比差异显著(P＜0.05)，而D2组与D1组相比差异不显著(P＞0.05)．在肝脏中，D2、D3和D4组之间的ME活性无显著差异(P＞0.05)。
　　 CLA对肝脏和肌肉脂肪酸成分有显著的影响。饱和脂肪酸(SFA)的主要成分是C16：0；单不饱和脂肪酸(MUFA)的主要成分是c18：1 n—9。随着CLA含量的增加，肝脏和肌肉中SFA含量和多不饱和脂肪酸(PUFA)含量也随之增加，而MUFA含量随之降低，并且D1—D4之间差异显著(P＜0.05)。在PUFA中，EPA(C20：5 n—3)和DHA(C22：6 n—3)约占PUFA的65％和63％，并且随着CIA含量的增加而显著增加。此外，肝脏和肌肉中CLA的含量与日粮中CLA含量相同呈等比增加。2．日粮CLA水平对大黄鱼免疫和抗氧化性能的影响
　　 使用不同CLA含量的日粮经过10周的饲喂后，D1—D4组大黄鱼的脾脏指数随着CLA含量的增加而显著增加，且与对照组相比差异显著(P＜0.05)。但是D3组和D4间无显著差异(P＞0.05)。血清中的溶菌酶和免疫球蛋白M(IgM)活性均有所提高，且与对照组相比差异显著(P＜0.05)。CLA能够提高血清补体C3，CA的活性，D3、D4组与D1组相比差异显著(P＜0.05)。此外，D3组的补体活性显著高于其它三组(P＜0.05)，与D1组相比，补体C3、C4活性分别提高了59％和65％．CLA也能够提高血清和组织中的SOD活性。肝脏中的SOD活性最高为202.89 U/ml，约为血清和肌肉SOD活性的1.7倍．D2—D4组的血清和肝脏SOD活性均显著高于D1组(P＜0.05)，但是CLA处理组之间差异并不显著(P＞0.05)．3．日粮CLA水平对大黄鱼肉品质的影响
　　 日粮中添加CLA能够显著影响大黄鱼肌肉的鲜味氨基酸和肌苷酸含量，且随着CLA含量的增加而增加(P＜0.05)．采用微波蒸馏．固相微萃取技术萃取大黄鱼肌肉中的挥发性成分，共检测出54中化合物，其中主要为挥发性醇类和羰基化合物。通过比较发现，各组大黄鱼肌肉挥发性化合物的种类及百分含量没有显著差异(P＞0.05)，但是能够提高部分具有特殊气味的醛酮类化合物含量。4．日粮CLA水平对大黄鱼肝脏PPAR基因表达的影响
　　 通过对大黄鱼肝脏PPARa和PPARγ基因进行克隆，确定了该两种基因的DNA序列，并采用实时荧光定量PCR法对PPARa和PPARγ基因进行了表达水平的分析，结果表明，日粮中添加CLA能够显著提高大黄鱼肝脏中PPARa和PPARγ基因的表达量(P＜0.05)。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：图表目录、英文缩略表

声明

致谢

序言

第一章文献综述

第一节大黄鱼种质特点和研究现状

1.形态

2.分布和种群

3.生活习性

4.生长

5.繁殖

6.洄游和渔汛

7.研究现状

第二节鱼类脂肪代谢的研究进展

1.脂肪的合成

2.脂类的分解和脂肪酸氧化

3.脂肪酸β-氧化的调控

4.鱼类的脂肪酸β-氧化

第三节鱼类免疫的研究进展

1.鱼类的非特异性异性免疫

2.鱼类的特异性免疫

3.鱼类的免疫应答及调节

第四节鱼肉品质风味的研究现状

1.滋味前驱物质

2.气味前驱物质

第五节共轭亚油酸(CLA)的结构功能与作用机制

1.共轭亚油酸的结构

2.共轭亚油酸的功能

3.共轭亚油酸的分子作用机制

4.小结

第二章日粮CLA水平对大黄鱼生长性能和脂肪代谢的影响

第一节日粮CLA水平对大黄鱼生长性能和体成分的影响

1.试验材料

2.试验方法

3.试验结果

4.讨论

5.结论

第二节日粮CLA水平对大黄鱼脂质成分的影响

1.试验材料

2.试验方法

3.试验结果

4.讨论

5.结论

第三节日粮CLA水平对大黄鱼脂肪代谢相关酶的影响

1.试验材料

2.试验方法

3.试验结果

4.讨论

5.结论

第四节日粮CLA水平对大黄鱼脂肪酸成分的影响

1.试验材料

2.试验方法

3.试验结果

4.讨论

5.结论

第三章日粮CLA水平对大黄鱼免疫和抗氧化性能的影响

前言

1.试验材料

2.试验方法

3.试验结果

4.讨论

5.结论

第四章日粮CLA水平对大黄鱼肉品质的影响

前言

1.试验材料

2.试验方法

3.试验结果

4.讨论

5.结论

第五章日粮CLA水平对大黄鱼肝脏PPAR基因表达的影响

前言

1.试验材料

2.试验方法

3.试验结果

4.讨论

5.结论

全文结论

创新点和后续研究展望

参考文献

作者简历