新型基因药物载体材料:聚羟丙基天冬氨酸-聚乙烯亚胺

摘要

目的：将聚羟丙基天冬酰胺(α，β-poly-(N-2-hydroxypropyl)-D，L-aspartamide，PHPA)作为骨架，偶联低分子量聚乙烯亚胺，以构建低毒、生物相容性好、安全性高的的新型非病毒基因载体PHPA-PEI，偶合叶酸配体、靶向于成纤维细胞生长因子受体的短肽(CY11)于载体上，构建了两种靶向于人宫颈癌细胞(HeLa)的载体系统。
　　 方法：聚琥珀酰亚胺(polysuccinimide，PsI)作为原材料，与3-氨基丙醇反应打开酰胺环，生成聚羟丙基天冬酰胺PHPA;PHPA侧链上的羟基经羰基二咪唑活化后偶联聚乙烯亚胺(PEI600)，得到载体的母体材料PHPA-PEI，再在母体材料基础上利用化学偶联方法偶联叶酸分子和短肽CY11。通过核磁共振氢谱、粒径电位测定、凝胶电泳阻滞实验、MTT细胞毒性实验、细胞转染等多种化学物理生物学实验，对聚合物结构性能进行研究。
　　 结果：合成载体骨架材料PHPA-PEI，并通过核磁共振氢谱图分析聚合物PHPA-PEI结构，得到平均3.25个PHPA单体上偶联一个PEI600分子。材料与质粒DNA形成的复合物粒径、zeta电位均在较理想的范围内。转染实验表明：材料PHPA-PEI在最佳N/P比下，效果优于PEI25kD。对于材料PHPA-PEI-FOL，在叶酸受体阳性细胞的转染效率是PEI25kD的2.5倍。同样，偶合短肽CY11后，在HeLa细胞上转染效率也大幅度提高。

目录

文摘

英文文摘

中英文对照表

第一章 绪论

1.1 基因治疗与基因载体

1.2 聚氨基酸为骨架材料的药物控释系统

1.2.1 聚赖氨酸，聚谷氨酸等材料应用于药物控释系统

1.2.2 聚天冬氨酸及其衍生物应用于药物控释系统

1.3 以聚乙烯亚胺为支链的非病毒基因载体

1.4 本课题问题的提出

参考文献

第二章 α，β-聚羟丙基-天冬酰胺偶合低分子量聚乙烯亚胺(PHPA-PEI)的研究

2.1 前言

2.2 材料与方法

2.2.1 实验材料与仪器

2.2.2 实验方法

2.2.3 表征方法

2.3 结果与讨论

2.3.1 PHPA-PEI的合成

2.3.2 表征结果

参考文献

第三章 叶酸受体介导的PHPA-PEI载体材料的研究

3.1 前言

3.2 材料与方法

3.2.1 实验材料与仪器

3.2.2 实验方法

3.2.3 表征方法

3.3 结果与讨论

3.3.1 PHPA-PEI-FOL的合成

3.3.2 表征结果

参考文献

第四章 偶合成纤维细胞生长因子的PHPA-PEI载体材料的研究

4.1 前言

4.2 材料与方法

4.2.1 实验材料与仪器

4.2.2 实验方法

4.2.3 表征方法

4.3 结果与讨论

4.3.1 PHPA-PEI-CY11的合成

4.3.2 表征结果

参考文献

第五章 全文总结

5.1 全文总结

5.2 主要创新点

就读期间发表的论文及参编书籍

致谢