迷走神经切断术后小鼠胰岛内胰岛素、Bax蛋白表达及nNOS免疫阳性神经末梢分布的变化

摘要

[目的]
　　 本实验主要通过免疫组织化学的方法,观察迷走神经干切断术后小鼠胰岛内胰岛素、Bax的蛋白表达和nNOS免疫阳性神经末梢分布的变化,探讨迷走神经切断术对胰岛素分泌、胰岛细胞的凋亡及NO在迷走神经调节胰岛素分泌中的作用,为进一步深入研究其在调控胰岛素分泌的机制提供资料。
　　 [方法]
　　 将28只小鼠随机分成实验组和对照组,其中实验组20只,对照组8只,对实验组小鼠行膈下迷走神经前、后干切断术,对照组仅打开腹腔,不切断迷走神经.分别于术后3、5、7、14d分时段处死小鼠,取胰,冷冻切片和石蜡切片,免疫组织化学方法观察小鼠胰岛内胰岛素、Bax的蛋白表达及nNOS免疫阳性神经末梢分布的变化。
　　 [结果]
　　 光镜下胰岛素蛋白表达定位于细胞质内,胰岛内大部分为胰岛素染色阳性细胞(胞浆着染棕色颗粒),即β细胞,图像分析显示:实验组各阶段胰岛素积分下吸光度均低于对照组,P＜0.01,有统计学意义.
　　 光镜下Bax蛋白表达定位于细胞质内,实验组和对照组胰岛内均有Bax蛋白的阳性表达,实验组小鼠胰岛内Bax蛋白的阳性表达水平较对照组有显著提高.
　　 nNOS免疫阳性神经末梢主要位于胰岛细胞团块周围或深入内部,呈树枝状或念珠状分布,大多成束走行.迷走神经切断后小鼠胰内胰岛nNOS免疫阳性神经末梢的分布密度明显低于正常对照组。
　　 [结论]
　　 迷走神经参与胰岛素分泌的调控。
　　 迷走神经切除后Bax基因的高表达,提示迷走神经参与调控胰岛细胞凋亡.
　　 胰岛内nNOS免疫阳性神经纤维应为副交感神经的节后纤维,部分可能是来源于结状神经节的内脏感觉纤维,提示NO是迷走神经调节胰岛分泌的主要神经递质之一.

目录

文摘

英文文摘

致谢

1 引言

2 材料和方法

2.1 材料

2.2 迷走神经切断造模和取材

2.3 组织切片和胰岛素蛋白的免疫组织化学显色

2.4 组织切片和Bax蛋白的免疫组织化学显色

2.5 组织切片和NOS免疫组织化学显色

3 结果

4 讨论

5 结论

参考文献

综述 胰岛的神经支配研究进展

作者简历