脱咖啡因儿茶素类化合物制备及其抗血管紧张素转换酶活性研究

摘要

茶儿茶素类化合物是一种优越的天然抗氧化剂,具有抗氧化、清除自由基、等生理活性功能,在药品、功能食品、食品添加剂和日化行业等领域广泛应用。茶叶中同时含有咖啡因和茶儿茶素类,脱咖啡因是茶叶儿茶素类制备的必须过程。开发产率高、成本低、安全性好的脱咖啡因技术将有利于拓展茶儿茶素类产品的应用范围,提高其附加值。
　　 本研究利用乙酸乙酯、正丁醇和正已烷等不同溶剂从绿茶中提取提取茶叶提取物,并以水和柠檬酸溶液洗脱咖啡因。以儿茶素类化合物产量和咖啡因含量为指标比较,证明适宜萃取条件为:100 g绿茶,3 L水80℃浸提40 min,所得茶汤以1.5 L乙酸乙酯溶液萃取3次,乙酸乙酯相以10 g.L-1柠檬酸溶液洗脱三次,干燥后所得产物含有694.47 mg.g-1儿茶素类和37.89 mg-g-1咖啡因。柠檬酸溶液脱咖啡因效果为78.8％,可作为替代传统氯仿脱咖啡因的方法。
　　 研究了N-乙烯吡咯烷酮接枝处理改善木质纤维素对儿茶素类的吸附能力,证明接枝改性后的木质纤维素对总儿茶素类的吸附能力提高49.47％,但达到吸附饱和所需要的时间延长。改性前木质纤维素在25 min时达到99％的吸附饱和,而接枝后的木质纤维素则需50 min才达到吸附饱和。接枝改性后的木质纤维素对茶汤(2.5 g·L-1)儿茶素类的吸附规律符合二级动力学模型。
　　 本文还研究了五种茶类34个茶样品对血管紧张素转换酶的体外抑制效果。结果表明,不同茶叶因加工方法不同对血管紧张素转换酶抑制效果存在明显差异.按照抑制率IC50值排序,其作用效果为:绿茶>乌龙茶>白茶>红茶>黑茶。以高效凝胶色谱法将绿茶和红茶提取物以及绿茶多酚提取物按分子量大小分为<3 kDa和>3 kDa两部分,并进行底物.酶动力学研究,证明酶作用速度曲线符合变构模型,不符合Michaelis-Menten关系.分子量<3 kDa的绿茶、红茶以及绿茶多酚提取物对血管紧张素转换酶的抑制效果不受底物浓度的影响.研究结果还表明,绿茶多酚提取物可直接钝化ACE活性,且属于不可逆反应.作者认为,茶叶提取物或茶多酚对血管紧张素转换酶的体外抑制机理为一种复杂的混合模式。