海螵蛸对吲哚美辛诱导的大鼠急性胃黏膜损伤的保护作用研究

摘要

NSAIDs作为一种已有百余年使用历史的传统解热镇痛和抗炎药物，因其确定的抗炎、止痛、退热、抗血小板聚集作用，已经被广泛应用于临床各学科。而且随着适应症的不断延伸，其使用量不断上升。但是NSAIDs最重要的胃肠道副反应，如出血糜烂性胃炎、消化性溃疡甚至出血等严重限制了临床应用。
　　海螵蛸作为一种传统的中药材料，历史悠久，应用广泛，可用于治疗胃酸过多、胃溃疡以及止血等。临床研究已显示，海螵蛸治疗消化性溃疡有效，但其治疗的作用机理还需研究，且对NSAIDs所致胃黏膜损伤的防治疗效尚未见研究。
　　本研究将通过制备吲哚美辛致大鼠急性胃粘膜损伤模型，采用现代药理学手段，按不同剂量的海螵蛸对模型大鼠进行保护性干预，比较各组干预对吲哚美辛诱导的大鼠急性胃黏膜损伤的保护效果，并对其可能的机制进行探讨。
　　材料和方法：
　　1.实验动物:采用清洁级、健康、性成熟、雄性SD大鼠60只（由浙江省药品检验所实验动物中心提供），体重150±15g。
　　2.动物分组和给药:大鼠随机分为6组，每组10只，禁食不禁水24h后，正常对照组和模型组给予蒸馏水灌胃，各药物治疗组分别以奥美拉唑4mg/kg、海螵蛸:高剂量组(3000mg/kg)、中剂量组（1500mg/kg）和低剂量组（750mg/kg）灌胃，半小时后除正常对照组外均再予吲哚美辛40mg/kg灌胃。所有灌胃容量均为1ml/100g大鼠体重。药物剂量按《药品注册管理办法》（局令第28号）要求设计并依照动物与人体间的等效剂量换算。
　　3.检测指标和方法
　　3.1胃标本大体损伤指数:观察胃标本大体情况并用游标卡尺测量损伤长宽径，按Guth标准详细记分。
　　3.2胃粘膜病理炎症积分:胃组织用10％福尔马林固定，常规切片，HE染色，按Rauws分级标准评分，应用总分的变化来衡量胃黏膜炎症的程度。
　　3.3血EGF和PGE2:按试剂盒说明书要求，以酶联免疫法测定。
　　3.4组织PGE2、MDA含量和SOD活性:标本先分别以酶联免疫、TBA及WST-1法测出组织PGE2、MDA浓度和SOD抑制率，再除以用BCA法测出的蛋白浓度，得出组织PGE2、MDA含量和SOD活性。
　　结果：
　　1.胃黏膜大体观察:肉眼观察发现，正常对照组大鼠胃黏膜光滑，色泽红润，黏膜皱襞纹理清晰;模型组大鼠胃腔内均见血性积液，黏膜表面附有大量血痂，用冰生理盐水冲洗后见粘膜充血水肿明显，弥漫点线状溃疡病灶;奥美拉唑组和海螵蛸高、中剂量组仅见少量点状糜烂，黏膜轻度充血;海螵蛸低剂量组可见胃黏膜充血和点线状溃疡病灶。
　　2.损伤指数:模型组损伤指数为(31.50±10.60)，奥美拉唑组和海螵蛸高、中剂量组损伤指数分别为（17.90±3.50）、(18.30±6.95)和(20.00±7.13)，均较模型组下降非常显著(p＜0.01)，海螵蛸低剂量组损伤指数为(24.50±6.79)，较模型组也下降显著(p＜0.05)。
　　3.炎症积分:模型组大鼠胃黏膜炎症积分(4.70±1.16)较正常对照组(1.70±0.82)明显升高(p＜0.01)。奥美拉唑组及海螵蛸高剂量组的胃黏膜炎症积分分别为(3.20±1.32)和(3.30±1.42)，均较模型组(4.70±1.16)下降非常显著(p＜0.01);海螵蛸中剂量组的胃黏膜炎症积分(3.40±1.08)较模型组下降显著(p＜0.05);海螵蛸低剂量组的炎症积分（3.90±1.00）较模型组有降低，但差异无统计学意义（p＞0.05）。
　　4.血清EGF水平:与正常对照组（90.47±18.97pg/ml）比较，模型组大鼠血中EGF（76.21±11.58pg/ml）水平下降(p＜0.05)。与模型组（76.21±11.58g/ml）比较，奥美拉唑组大鼠血EGF水平（92.31±13.79pg/ml）升高(p＜0.05)，海螵蛸高、中、低剂量组大鼠血EGF水平（111.42±13.33pg/ml;97.01±14.49pg/ml;117.83±15.36pg/ml）升高非常显著(p＜0.01)。
　　5.血清PGE2水平:模型组大鼠血中PGE2水平（100.63±32.78pg/ml）较正常对照组(111.00±16.11pg/ml)比较有所下降，但差异无统计学意义（p＞0.05）。奥美拉唑组和海螵蛸各剂量组大鼠血PGE2水平(139.60±30.67pg/ml;144.61±20.8pg/ml;136.86±21.70pg/ml;163.30±34.58pg/ml)均较模型组(100.63±32.78pg/ml)升高非常显著(p＜0.01)。
　　6.组织PGE2水平:模型组大鼠组织中PGE2水平（12.11±2.10pg/mgprol）较正常对照组（16.00±3.78pg/mgprol）显著下降(p＜0.01)。奥美拉唑组和海螵蛸高、中剂量组大鼠组织PGE2水平（15.74±2.50pg/mgprol;15.94±3.56pg/mgprol;16.77±2.79pg/mgprol）均较模型组（12.11±2.10pg/mgprol）升高非常显著(p＜0.01)，海螵蛸低剂量组（15.45±2.94pg/mgprol）较模型组也升高显著(p＜0.05)。
　　7.组织MDA含量:模型组大鼠胃组织中MDA含量（0.32±0.06nmol/mgprol）较正常对照组（0.22±0.04nmol/mgprol）升高非常显著(p＜0.01)。奥美拉唑组和海螵蛸各剂量组大鼠组织MDA含量（0.21±0.03nmol/mgprol;0.26±0.03nmol/mgprol;0.25±0.05nmol/mgprol;0.25±0.05nmol/mgprol）均较模型组（0.32±0.06nmol/mgprol）降低非常显著(p＜0.01))。
　　8.组织SOD活性:模型组大鼠组织中SOD活性（1.50±0.20U/mgprol）较正常对照组（2.05±0.29U/mgprol）降低非常显著(p＜0.01)。奥美拉唑组和海螵蛸各剂量组大鼠组织SOD活性均有升高，但仅有海螵蛸高剂量组（2.51±0.38U/mgprol）与模型组间的差异有非常显著的统计学意义(p＜0.01)。
　　结论：
　　海螵蛸能有效地预防吲哚美辛诱导的大鼠急性胃黏膜损伤，其疗效可能与刺激细胞因子EGF的分泌、增加PGE2的合成和分泌及防止脂质过氧化和激活清除自由基的酶有关。