HBsAg确证实验与CHB患者血清miRNA-122等指标的分析应用

摘要

目的：探讨初诊HBsAg检测阳性患者标本进行抗体中和确证实验的研究;观察在CHB四个不同发病时期中，人外周血清中肝脏特异性miRNA-122表达量的变化和意义;探讨血清HBV-DNA低复制的CHB患者相关指标的变化及意义。
　　方法：收集CLIA法定量检测HBsAg阳性标本1974例，应用GICA、ELISA等方法复检HBsAg并进行统计学分析;此外，对CLIA法HBsAg阳性而ELISA法阴性的标本进行了CLIA法中和确证实验。收集80例CHB患者标本，采用FQ-PCR法和CLIA等方法对miRNA-122、HBV-DNA、HbeAg、HbsAg和ALT进行测定，对结果进行比较和线性相关分析。收集HBV-DNA低复制的CHB患者标本229例，进行mIL-2R、IL-10、miRNA-122等指标进行比较分析。
　　结果：对CLIA法检测的HBsAg阳性的标本使用GICA和ELISA两种方法进行复检后发现，GICA和ELISA法检测HBsAg均有漏检现象的发生，其漏检率分别占HBsAg阳性标本的9.1％(180/1974)和25.4％(501/1974)，而这些漏检的标本主要集中在CMIA法HBsAg检测值≤10.0IU/ml的样本中，而该浓度范围标本占HBsAg阳性标本的比例高达26.90％(531/1974)。本文将180例CMIA法HBsAg阳性标本而ELISA法漏检的标本经CMIA法中和确证实验阳性率为96.67％(174/180)。其中有6例无法确认，通过HBV-DNA检测与两周后随访确认3例为乙肝病毒感染病例，另3例排除。miRNA-122在CHB患者四个时期表达量均明显升高，尤其在免疫耐受期和免疫清除期升高显著（P＜0.01）;miRNA-122与HbeAg和HBV-DNA相关性不强(r=0.263，r=0.171)，与HbsAg和ALT相关性较强(r=0.597，r=0.767)。低复制CHB患者中e抗原阳性患者占38.00％，e抗原阴性患者占51.53％;229例患者ALT升高者占总数的66.81％，患者血浆miRNA-122的表达量的变化与ALT浓度呈正相关（r=0.841）。e抗原阳性与e抗原阴性组IL-10、mIL-2R浓度与对照组比较均有统计学差异(P＜0.05)。
　　结论：ELISA等定性方法在低浓度HBsAg标本的检测上与CLIA等定量方法相比存在明显不足。实验室对首诊乙肝HBsAg检测的标本应首选检测灵敏度高的CLIA法进行检测，对低浓度HBsAg阳性患者应通过采集双份血清、中和试验、HBV-DNA检测以及随访建立档案等予以确认，避免漏诊误诊。miRNA-122和乙肝病毒复制可能没有关系，但对于乙肝的辅助诊断、评估及健康管理等具有重要的意义。HBV-DNA低复制CHB患者mIL-2R、IL-10、miRNA-122等指标的变化证明此类患者部分病例仍存在肝细胞实质性的损害，临床应高度重视，尤其要与非活动性乙型肝炎病原携带状态相鉴别，不可一概而论。