声明
致谢
摘要
缩略表
第一章 绪论
1.1 引言
1.2 内耳干细胞的基本特性及分布
1.3 内耳干细胞分化为内耳毛细胞的研究进展
1.4 其它干细胞分化为毛细胞的研究进展
1.5 内耳干细胞分化为内耳毛细胞的分子机制
1.5.1 细胞周期蛋白抑制剂
1.5.2 Atoh1
1.5.3 Notch信号通路
1.5.4 内耳毛细胞的存活和成熟机制
1.5.5 内耳毛细胞发育过程中相关分子的相互作用
1.6 内耳中不同细胞特异性分子标志的研究进展
1.7 研究的目的、方法和意义
参考文献
第二章 新生小鼠内耳干细胞的分离、培养与鉴定
2.1 前言
2.2 实验材料与仪器
2.2.1 实验材料
2.2.2 主要实验试剂
2.2.3 常用仪器
2.2.4 常用试剂配置
2.3 试验方法
2.3.1 小鼠内耳耳蜗基底膜的分育
2.3.2 内耳干细胞的分离及培养
2.3.3 内耳干细胞的鉴定
2.3.4 内耳于细胞传代
2.3.5 统计学处理
2.4 实验结果
2.4.1 小鼠内耳干细胞的培养与传代
2.4.2 小鼠内耳干细胞标志基因检测
2.4.3 小鼠内耳干细胞Nestin检测
2.4.4 小鼠内耳干细胞Brdu检测
2.5 讨论
2.6 本章小结
参考文献
第三章 小鼠内耳干细胞体外诱导分化为毛细胞
3.1 前言
3.2 实验材料与仪器
3.2.1 实验材料
3.2.2 主要实验试剂
3.2.3 常用仪器
3.2.4 常用试剂配置
3.3 实验方法
3.3.1 内耳干细胞的分育与培养
3.3.2 鸡胚椭圆囊基质细胞的分离、培养与处理
3.3.3 小鼠内耳干细胞的诱导分化
3.3.4 不同发育阶段标志基因的检测
3.3.5 内耳祖细胞特异性蛋白检测
3.3.6 内耳毛细胞特异性蛋白的检测
3.3.7 扫描电子显微镜的检测
3.3.8 毛细胞电生理的检测
3.4 实验结果
3.4.1 内耳干细胞体外诱导分化的形态变化
3.4.2 内耳祖细胞Pax-2及Pax-8蛋白检测
3.4.3 内耳干细胞分化发育过程中基因的表达情况
3.4.4 内耳干细胞诱导分化之后的蛋白检测
3.4.5 毛细胞静纤毛与动纤毛的蛋白检测
3.4.6 毛细胞的电镜检测
3.4.7 毛细胞的电生理检测
3.5 讨论
3.6 本章小结
参考文献
第四章 毛细胞发育过程中特异性分子标志的筛选
4.1 前言
4.2 实验材料与仪器
4.2.1 实验材料
4.2.2 主要实验试剂
4.2.3 常用仪器
4.2.4 常用试剂配置
4.3 试验方法
4.3.1 内耳干细胞的分育、培养与诱导分化
4.3.2 内耳干细胞及内耳祖细胞RNA的准备
4.3.3 内耳毛细胞的流式分选
4.3.4 基因表达谱的检测
4.3.5 特异基因的筛选及验证
4.4 实验结果
4.4.1 内耳毛细胞的流式分选
4.4.2 内耳干细胞、祖细胞及毛细胞RNA的提取及质量检测
4.4.3 基因表达谱芯片检测
4.4.4 特异性标志基因的筛选
4.4.5 特异性标志基因的验证
4.5 讨论
4.6 本章小结
参考文献
第五章 结论与展望
博士期间的科研成果