AQP5表达量在渗透压对卵巢癌顺铂敏感性的影响中发挥重要作用

摘要

研究目的:探索渗透压对卵巢癌细胞水通道蛋白表达的影响及渗透压是否可以调节卵巢癌细胞的顺铂敏感性，并探讨卵巢癌顺铂化疗敏感性是否有与细胞的水通道蛋白表达有关。
　　方法:用不同浓度的山梨糖醇溶液建立细胞外高渗透压环境，利用MTT实验分析高渗环境对卵巢癌细胞系3AO细胞增殖以及对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响，采用定量PCR实验及westren blot实验检测高渗透压及顺铂或二者联合对卵巢癌细胞水通道蛋白表达的影响，利用慢病毒介导的小干扰RNA使细胞AQP5表达下调，并用MTT实验检测AQP5下调后卵巢癌细胞对高渗透压环境的耐受性。
　　结果:1、高渗环境对卵巢癌细胞增殖的抑制作用随着作用时间和浓度的增加而增加。2、细胞外高渗的环境可以诱导AQP5的表达，主要在高渗透压环境处理细胞48h后效果明显，该作用具有时间效应和浓度效应。3、利用siRNA下调AQP5表达后，卵巢癌细胞对高渗透压环境的耐受性下降。4、不同浓度的顺铂对AQP5表达的影响呈现出先增高后降低的趋势，峰值出现在2.5μg/ml浓度的顺铂处。5、MTT结果表明，在3AO细胞中，对于小剂量的顺铂(小于2.5μg/ml c-DDP)来说，细胞外高渗可以促进顺铂的毒性作用;但是，顺铂浓度较高时（超过5μg/mlc-DDP)，高渗环境反而减弱细胞的毒性作用。高渗透压对卵巢癌细胞AQP5表达以及顺铂敏感性均有影响，且高渗对顺铂敏感性的影响方式与顺铂影响AQP5表达的方式呈现出相似性。
　　结论:我们的研究表明，在卵巢癌中，细胞外高渗环境可以诱导AQP5 mRNA表达增加，并可以影响顺铂对卵巢癌细胞的毒性作用，而这种影响与细胞AQP5的表达密切相关。

目录

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致谢

摘要

1 引言

2 资料与方法

2．1 主要实验仪器

2．2 主要实验试剂

2．3 细胞培养及高渗透压建模

2．4 细胞增殖抑制实验

2．5 RNA提取与逆转率及定量PCR实验

2．6 western blot实验

2．7 介导小干扰RNA(siRNA)的慢病毒转染实验

3 统计方法与数据分析

4 结果

4．1 细胞外高渗环境对卵巢癌细胞增殖的影响

4．2 卵巢癌中高渗环境对细胞AQPs亚型表达的影响

4．3 卵巢癌细胞AQP5表达下调后对胞外高渗环境的反应性

4．4 高渗透压环境对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响

4．5 高渗透压环境对卵巢癌细胞顺铂敏感性的影响与AQP5表达相关

5 讨论

6 结论

参考文献

综述 水通道蛋白与卵巢癌的相关性研究进展

作者简历