用于急性肝损伤防治的益生菌分离筛选及其作用机制研究

摘要

人体肠道内定植着数目庞大(1014)、结构复杂（超过1000种细菌）的微生物群。大量研究证实肠道微生态失衡与肝病有着密切的关系，应用益生菌调节肠道微生态平衡进而治疗肝病的方法已受到广泛关注。
　　本实验的目的是从健康人体筛选并研究具有自主知识产权的可用于防治肝病的益生菌。实验步骤为从健康人体肠道筛选潜在益生菌，经过形态学观察、基质辅助激光解析电离飞行时间质谱鉴定和16S rDNA序列分析后得到36株益生菌。继续进行耐酸实验、耐胆盐实验和抑制致病菌实验后，选择性能优良的5株益生菌:乳杆菌Lac-5、乳杆菌Lac-10、乳杆菌Lac-15、乳杆菌Lac-16和片球菌Ped-1，分别给SD大鼠灌胃8天，然后采用D-半乳糖胺腹腔注射造成大鼠急性肝损伤，剂量为1.1 g/kg。24h后处死大鼠，检测肝功能、血清细胞因子、肝脏和肠道组织病理、细菌易位和肠道菌群组成等指标。
　　结果显示乳杆菌Lac-15、乳杆菌Lac-16、乳杆菌Lac-10和片球菌Ped-1可以降低AST水平，乳杆菌Lac-15和片球菌Ped-1可以降低ALT水平、升高血清IL-10水平、阻止血清总胆红素上升。乳杆菌Lac-10和片球菌Ped-1可以升高血清INFγ水平。
　　乳杆菌Lac-15、乳杆菌Lac-16、乳杆菌Lac-10和片球菌Ped-1均可以减轻由D-半乳糖胺造成的肝脏损伤，此外只有乳杆菌Lac-15和片球菌Ped-1可以减轻肠道黏膜损伤。
　　乳杆菌Lac-15、乳杆菌Lac-5和片球菌Ped-1可以有效减轻细菌易位。应用PCR-DGGE分析后发现预先应用乳杆菌Lac-15和片球菌Ped-1可以显著改变急性肝损伤大鼠的肠道菌群结构。
　　最后我们对菌株Lac-15和Ped-1的基因组进行了测序，并从基因组学的角度分析了菌株益生性能和减轻肝损伤能力的机理。
　　因此，本研究所筛选的两株益生菌Lac-15和Ped-1性能优良，为后续开发具有自主知识产权的防治肝病的益生菌制剂奠定了良好的基础。

目录

声明

论文说明

致谢

摘要

缩写、符号及术语表

绪论

第一章 健康人体肠道潜在益生菌的分离、鉴定及功能特性研究

前言

1．材料和方法

2．结果

3．结论

第二章 益生菌对急性肝损伤大鼠的作用及机制研究

前言

1．实验材料

2．实验方法及检测指标

3．结果

4．讨论

第三章 菌株Ped-1和Lac-15的基因组学研究

前言

1．实验材料

2．实验方法

3．结果

4．结论

参考文献

综述 微生态制剂与肝病的研究进展

作者简历及在读期间所取得的科研成果