益生菌及复合酶制剂对乌鳢生长性能的影响及机制研究

摘要

本试验研究了益生菌与复合酶制剂以及它们的互作效应对乌鳢生长性能，鱼体组成成分，消化酶活性，胃肠道形态，血清生化指标以及肠道微生物的组成的影响。并探讨了其作用机制，为益生菌与复合酶制剂应用于肉食性鱼类提供了理论依据。
　　首先对几种益生菌进行了抗逆性筛选，对益生菌进行了耐热、耐酸和耐胆汁的验证试验，选择了解淀粉芽孢杆菌作为添加的益生菌。其次做了酶的酶活测定与体外消化试验，确定了以淀粉酶、酸性蛋白酶、木瓜蛋白酶进行酶制剂复合以及添加比例。养殖试验周期为50天，预实验为一周，试验用乌鳢400条，分为四个处理组，每个处理组5个网箱，每个网箱20尾乌鳢。试验设对照组、益生菌组、酶制剂组和益生菌酶制剂组，分别投放相对应的日粮。试验结束后对各个处理组乌鳢进行屠宰取样进行测定分析，取得的主要结果如下:
　　1、与对照组比，添加益生菌后乌鳢生长性能没有显著性变化(P＞0.05)，复合酶制剂提高了乌鳢的末均重、增重率以及摄食率(P＜0.05)，益生菌复合酶制剂也没有显著影响乌鳢生长（P＞0.05）。
　　2、添加复合酶制剂使乌鳢的胃蛋白酶、胃淀粉酶、肝胰脏蛋白酶和肝胰脏淀粉酶等酶活有显著提高(P＜0.05)。益生菌组没有影响消化酶酶活(P＞0.05)。益生菌复合酶制剂的胃蛋白酶、肝胰脏蛋白酶和肝胰脏淀粉酶酶活有显著提高(P＜0.05)，其他指标差异不显著（P＞0.05）。
　　3、添加益生菌后，乌鳢低密度脂蛋白胆固醇的含量显著降低(P＜0.05)。复合酶制剂使乌鳢白蛋白含量与总蛋白含量显著提高(P＜0.05)。和对照组比，三个试验组的血清AKP的活性均有显著上升（P＜0.05），尿酸含量显著下降(P＜0.05)。
　　4、添加益生菌与酶制剂后，乌鳢的胃绒毛由疏松变得致密，通过扫描电镜不能发现四个组别的显著差异。观察乌鳢前肠的H&E染色发现使用了复合酶制剂，乌鳢小肠绒毛排列更为致密整齐美观，其他组没有明显差异。而H&E染色观察后肠发现，益生菌和酶制剂使乌鳢后肠的厚度有了一定程度的增加，小肠绒毛排列更为致密规则，绒毛高度也有一定增加，而通过扫描电镜可以观察到对照组后肠表面微绒毛有轻微损伤现象，益生菌组中乌鳢微绒毛表面有个别缺失，使用了酶制剂乌鳢微绒毛排列比较整齐密集，形状比较规则，盲囊无明显变化。
　　5、肠道菌群结构分析表明，鸟鳢肠道内菌群在门水平上主要以螺旋菌、变形菌、硬壁菌和多形杆状菌等几种细菌为主。在使用了益生菌后，α多样性的各种指数，如Ace、Chao1等指数发生显著性提高(P＜0.05)，其他组别均没有显著性差异(P＞0.05)，并且在使用了益生菌与酶制剂后，乌鳢肠道内各种优势茵群的相对丰度发生了一系列的变化。通过PCoA点状图分析组间差异，发现使用了不同添加剂的组别有相互聚集的趋势。
　　综上所述，益生菌与复合酶制剂能够对乌鳢的生长性能、消化酶活性、血清指标、消化道形态、肠道微生物等方面产生影响。