声明
致谢
摘要
引言
1.1小麦赤霉病概述
1.2赤霉病原菌生物学特征
1.3赤霉病原菌侵染循环
1.4小麦赤霉菌病害治理
2 ATP-binding cassette(ABC)转运蛋白研究概述
2.1 ABC转运蛋白概述
2.2 ABC转运蛋白分类
2.3 ABC转运蛋白的功能
2.4 ABC蛋白在真菌调控铁动态平衡的研究进展
2.5 ABC蛋白在真菌致病中的研究进展
3本研究的目的和意义
1.1菌株与载体
1.2植物材料
2实验方法
2.1禾谷镰刀菌的培养和保存方法
2.2禾谷镰刀菌基因组DNA的小量提取
2.3禾谷镰刀菌基因组IDNA的大量制备(CTAB法)
2.4 PCR技术
2.5 DNA琼脂糖凝胶电泳
2.6 PCR产物的纯化
2.7基因克隆技术
2.8禾谷镰刀菌基因敲除载体的构建
2.9禾谷镰刀菌融合标签的基因回补载体的构建
2.10 PEG介导的禾谷镰刀菌原生质体转化
2.11禾谷镶刀菌转化子的验证
2.12 Southern blot杂交
2.13总RNA的提取、eDNA的合成和基因的表达量分析
2.14 Western blot分析
2.15免疫共沉淀(Co-IP)实验
2.16双分子荧光互补(BIFC)实验
2.17禾谷镰刀菌表型测定
2.18禾谷镰刀菌致病性测定
2.19 DON毒素测定
2.20铁含量和噬铁素含量测定
2.21酶活测定
2.23活性氧含量测定
2.24酵母双杂交实验
2.25染色质免疫共沉淀(ChIP-PCR)实验
2.26 Phos-tag检测实验
2.27 EMSA(电泳迁移率变动分析)实验
第三章结果与分析
1.1禾谷镰刀菌中ABC转运蛋白的鉴定与敲除
1.2 FgAtm1参与铁动态平衡的调控过程
1.3 FgAtm1调控铁在线粒体和胞内的含量
1.4 FgAtm1调控细胞质铁硫蛋白的活性
1.5 FgATM1的敲除激活转录因子级联FgAreA-HapX
1.6 FgHapX直接转录抑制铁利用相关基因而通过对另一个转录因子FgSreA的抑制来间接激活铁吸收基因
1.7 FgHapX与FgGrx4互作调控铁的动态平衡
1.8丝苏氨酸激酶FgYaK1对FgHapX的磷酸化调控其转录活性
1.9小结与讨论
2禾谷镰刀菌中ABC蛋白FgArb1调控致病机制的研究
2.1 FgArb1参与禾谷镰刀菌的致病机制研究
2.2 FgArb1参与致病机制的功能研究
2.3 FgArb1调控禾谷镰刀菌无性和有性生殖
2.4 FgArb1调控小核糖体亚基的细胞核输出
2.5 FgArb1的乙酰化修饰对其功能的重要性分析
2.6小结与讨论
1全文结论
2后续工作展望
参考文献
附录