结合珠蛋白在脑出血后脑水肿形成中抑制作用的研究

摘要

目的:研究已证实,脑出血(ICH,intercerebral hemorrhage)后血肿中红细胞溶解释放的血红蛋白Hb(hemoglobin)及Hb降解产物在脑出血后脑水肿形成中起着重要作用。结合珠蛋白Hp( haptoglobin)是血液中重要成分,可与Hb结合形成紧密的非共价复合物Hb-Hp,使Hb降解受抑制,据此推测Hp在脑出血后脑水肿形成中具有抑制作用。本课题拟通过在SD大鼠脑内研究自体全血中去除或外加Hp后对实验性ICH模型血肿中Hb及其代谢产物含量变化及其与血肿周围脑组织含水量、血脑屏障变化、炎性细胞因子含量、自由基形成的关系。方法:将100只200-250g成年健康雄性SD大鼠随机分成四组:假手术组(25只)、ICH组(25只)、Hp去除组(25只)、Hp干预组(25只)。①假手术组②ICH对照组③Hp去除组:断尾取血100ul,采用亲和层析法去除Hp。采用立体定向大鼠尾状核注入去除Hp后的自体全血50ul制作。④Hp干预组:断尾取血100ul,加入100ul所需Hp冻干粉相应量,采用立体定向大鼠尾状核注入外加Hp后的自体全血50ul制作。按上述不同术后时间断颈处死大鼠,仔细分离大脑及血肿标本进行相应处理.①观察上述四组不同时间血肿中Hb及Hb降解产物(血红素、CO、铁离子、胆红素)含量变化。采用免疫组化分析及分光光度法。②观察脑组织含水量的变化③观察脑组织自由基SOD、MDA含量变化④观察上述四组不同时间血肿周围脑组织炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-a含量变化⑤观察上述四组不同时间血肿周围脑组织血脑屏障病理变化:采作光镜和电镜观察。结果:1.假手术组在术后各时点神经功能障碍评分、脑组织含水量、Hb及其降解产物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、SOD、MDA含量均未见明显异常。2.ICH对照组、Hp去除组神经功能障碍评分和SOD活力显著高于假手术组;脑组织含水量、Hb及其降解产物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、MDA含量显著低于假手术组。3.Hp干预组神经功能障碍评分和SOD活力显著高于ICH对照组、Hp去除组;而脑组织含水量、Hb及其降解产物含量、IL-6、IL-1β、TNF-a、MDA含量显著高于假手术组。结论:1.ICH后,大鼠出现明显神经功能损害,脑组织含水量增加,出现血肿周围脑组织水肿、炎性细胞浸润、炎性细胞因子产生、自由基大量生成、MDA含量明显升高,SOD活力明显下降。2.ICH后3天红细胞大量溶解,脑水肿达高峰,血肿周围脑组织Fe含量、血红素含量、UCB含量和CO含量显著并且持续升高,脑水肿消退后血肿周围脑组织仍有Fe、血红素、UCB和CO蓄积。3.Hp治疗ICH大鼠能显著改善其神经缺失症状、减轻脑水肿、降低MDA含量,提高SOD活力;Hp低表达时加剧ICH引起的脑损伤,Hp缺乏时会使脑损伤恶化,而Hp的过度表达则减轻ICH-介导的脑损伤。4.Hp对ICH后脑水肿及脑损伤具有脑保护作用;其机制可能与其降低脑Fe含量、血红素含量、UCB含量和CO含量含量,从而减轻脑组织氧化损伤有关。

目录

封面

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中文摘要

英文摘要

前言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 主要实验试剂

3 主要实验仪器

结果

1 模型成功评价

2 假手术组、ICH组、Hp去除组和Hp干预组神经功能障碍评分

3假手术组、ICH对照组、Hp去除组和Hp干预组血肿周围脑组织含水量

4 假手术组、ICH对照组、Hp去除组和Hp干预组血肿中血红蛋白及其降解产物的变化

5 假手术组、ICH对照组、Hp去除组和Hp干预组血肿周围脑组织MDA含量

讨论

1. ICH后病理生理损害机制

2．1 ICH与脑水肿

2．2 脑出血与炎性因子

2.3 脑出血后自由基损伤

2.4 血红蛋白及其降解产物与脑损伤

4 Hp对ICH脑损伤的保护作用

结论

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

结合珠蛋白对脑出血后脑损伤保护作用的研究进展

1 Hb及其降解产物在ICH后脑水肿形成中的作用

2.Hp对ICH后脑损伤的神经保护作用

3 Hp表达增强剂对ICH后脑损伤的保护作用

4 展望

参考文献