泡球蚴囊液对原代培养大鼠肝细胞增殖影响的初步研究

摘要

目的: 1.成功建立大鼠肝细胞的无血清原代培养体系。2.探讨泡球蚴囊液对体外无血清原代培养大鼠肝脏细胞增殖的影响。 方法:1.以Wistar大鼠作肝细胞供者，采用胶原酶肝脏原位灌流消化法分离大鼠肝细胞，并以1×106的密度接种于Ⅰ型胶原铺底的直径35mm的培养皿，分别采用血清和无血清培养24h和48h，并在肝细胞形态学和肝细胞增殖指数上对两者进行比较，建立大鼠肝细胞无血清原代培养体系。2.大鼠肝细胞无血清培养体系建立后，分别用无菌的泡球蚴囊液及无血清培养液与大鼠肝细胞共培养24h和48h，培养期间用荧光倒置显微镜观察大鼠肝细胞的形态学改变，用流式细胞仪测定大鼠肝细胞的细胞周期；同时将分离所得的大鼠肝细胞以1×105的密度接种于Ⅰ型胶原铺底的96孔培养板，无血清培养后，采用MTT法检测泡球蚴囊液对大鼠肝脏细胞是否有毒性作用。 结果: 1.大鼠肝细胞无血清培养体系的建立：大鼠肝细胞活细胞分离存活率＞90％，与血清原代培养的肝细胞相比，无血清原代培养的肝细胞生长良好，24h和48h肝细胞增殖指数略微增加，差异无统计学意义(P＞0.05)。2.与对照组相比，与泡球蚴囊液共培养的肝细胞贴壁生长良好；MTT法显示泡球蚴囊液对肝细胞无细胞毒性作用；泡球蚴囊液处理24小时后肝细胞增殖指数(PI)由82.0％±6.0％降至49.35％±4.0％；处理48小时后肝细胞增殖指数(PI)由67％±10％降低至27.61％±6％，差异有统计学意义(P＜0.05)。 结论: 1.成功建立大鼠肝细胞无血清培养体系。2.泡球蚴囊液对于体外培养的大鼠肝细胞无毒害作用，但对肝细胞的增殖有一定的抑制作用。

目录

论文说明：英文缩略语表

声明

摘要

前言

材料与方法

1.材料

1.1 实验动物

1.2主要试剂和酶

1.3主要生化试剂

1.4主要仪器

2.方法

2.1 大鼠肝细胞无血清培养体系的建立

2.2泡球蚴囊液对无血清原代培养大鼠肝细胞增殖情况的影响

结果

讨论

小结

致谢

参考文献

泡型棘球绦虫ERK信号传导通路的研究进展

攻读硕士学位期间发表的学术论文