细粒棘球绦虫抗原B8-KDa亚单位在虫体发育过程中的选择性表达

摘要

目的：研究细粒棘球绦虫抗原B（EgAgB)8-kDa亚单位基因家族成员（EgAgB8/1、EgAgB8/2、EgAgB8/3、EgAgB8/4、EgAgB8/5)在虫体发育各阶段（虫卵、棘球蚴生发层、原头蚴及成虫）基因表达的差异，为包虫感染中间宿主和终末宿主的免疫学诊断筛选特异性优势表达抗原。方法：分别从细粒棘球绦虫成虫、虫卵、原头蚴和棘球蚴生发层提取总RNA，用AMV First Strand cDNA Synthesis Kit反转录成cDNA，根据EgAgB 5个亚单位（EgAgB8/1、EgAgB8/2、EgAgB8/3、EgAgB8/4、EgAgB8/5）序列设计跨越内含子的基因特异性引物；基因表达差异应用SYBR Green I荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术进行定量分析并用内参对照基因actin II来标准化定量结果。结果：成功建立标准曲线和SYBR Green I荧光实时定量PCR(Real-time PCR)技术对EgAgB阶段性基因表达的定量分析方法；分析显示，EgAgB8/1和EgAgB8/2在棘球蚴生发层大量表达(68.874和16.258)， EgAgB8/3和EgAgB8/5在成虫阶段有大量表达(1905.512 and 180.315)，EgAgB8/4 在成虫、虫卵和原头蚴的表达水平（0.001、0.088和0.102）均较棘球蚴生发层表达量（3.576）低。结论：EgAgB 5个亚单位的基因表达在虫体发育各个阶段显现出明显差异：①EgAgB8/1和EgAgB8/2 可作为包虫感染中间宿主免疫学诊断最佳候选目的抗原,EgAgB8/3可作为包虫感染终末宿主免疫学诊断的靶抗原；②EgAgB 5个亚单位的阶段差异表达可能与其虫体发育不同阶段特有的生物学功能有关，有待进一步研究。

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综述 棘球绦虫抗原B的研究进展

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