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异常黑胆质型体液与免疫指标及白细胞结构基因表达谱的关系

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前言

研究内容与方法

1 研究内容

1.1 研究对象

1.2 维医体液辨证分型

1.3 纳入标准

2 方法

2.1 免疫指标检测方法

2.2 转录组学研究方法

2.3 采用实时荧光定量PCR技术对实验结果进行验证

2.4 质量控制

结果

1 免疫指标研究结果

1.1 免疫球蛋白、补体、C肽、糖化血清蛋白

1.2 血脂

2 转录组学研究结果

2.1 受试者基本资料

2.2 RNA 质检结果

2.3表达谱芯片结果

2.4 正常体液型组与异常黑胆质型糖尿病组间差异表达基因

2.5异常黑胆质型与非异常黑胆质型糖尿病组间差异表达基因

2.6 特异基因(RAC1)分析

3 相对实时荧光定量PCR技术验证结果

3.1 RAC1、PRLR的mRNA的表达

讨论

小结

致谢

参考文献

综述

攻读硕士学位期间发表的论文

导师评阅表

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摘要

目的:探讨异常黑胆质型体液与免疫指标及白细胞结构基因表达谱的关系,为阐述异常黑胆质型体液及“同病异证论”的科学内涵提供科学依据。
  方法:根据维吾尔医体液辩证分型标准,将志愿受试者辩证分为正常、异常黑胆质、非异常黑胆质型体液组及异常黑胆质、非异常黑胆质型糖尿病组等五个组,检测血清免疫球蛋白(IgA、IgG)、补体(C3、C4)、C肽(CP)、糖化血清蛋白(GSP)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDLC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDLC)、总胆固醇(TC)水平;应用Affymetrix表达谱芯片,对正常人、典型的异常黑胆质及非异常黑胆质型II型糖尿病组的白细胞结构基因表达水平进行检测,筛选出差异表达基因,采用相对实时荧光定量PCR技术对部分差异表达基因进行mRNA水平的验证,进而进行生物信息学分析。
  结果:
  1)与正常体液分型组相比,异常体液分型(异常黑胆质型、非异常黑胆质型体液)组人群血清 IgA、IgG、C3、C4、CP、GSP水平偏高,尤其是异常黑胆质体液分型组人群血清IgA、IgG水平及非异常黑胆质体液分型组人群血清C3、C4水平变化更为明显。
  2)五组人群血清TG、HDLC、LDLC、TC水平相比,异常黑胆质型糖尿病组人群血清TG水平较其余四组偏高,而HDLC水平偏低。差异均有统计学意义(P<0.05)。
  3)与正常体液分型组相比,异常黑胆质型糖尿病组患者白细胞差异表达基因共171条,其中表达上调的基因155条、表达下调的基因16条;与非异常黑胆质型糖尿病相比、异常黑胆质型糖尿病患者白细胞中75条基因表达上调。
  结论:
  1)异常体液分型人群中存在免疫功能紊乱,血清 IgA、IgG、C3、C4、CP、GSP水平偏高可能是正常体液生成异常体液(异常黑胆质型、非异常黑胆质型体液)过程中所发生的共同变化,在形成异常黑胆质型体液过程中IgA、IgG水平的变化,而在形成非异常黑胆质型体液过程中C3、C4水平的变化更为明显,MAPK、Toll样受体、JAK-STAT信号通路相关基因的差异表达可能是异常黑胆质型体液出现免疫功能紊乱的分子机制。
  2)异常黑胆质型糖尿病对冠心病的易感性较非异常黑胆质型糖尿病高,Wnt、JAK-STAT信号通路、糖代谢相关基因的差异表达可能是异常黑胆质型糖尿病易患冠心病的分子机制。
  3)正常人、不同体液分型糖尿病患者白细胞结构基因转录表达谱存在差异,尤其是异常黑胆质体液分型患者白细胞转录表达谱存在的差异更为明显,而且差异表达基因主要与糖尿病、肿瘤、高血压等疾病的发生有关,这些基因的差异表达可能是异常黑胆质体液分型人群易患复杂性疾病及“同病异证论”科学内涵所在。

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