新疆维吾尔族弥漫大B细胞淋巴瘤免疫表型、抗凋亡特性及PI3K/Akt/mTOR信号转导机制的研究

摘要

目的：1）研究弥漫大B细胞淋巴瘤（diffuse large B-cell lymphoma，DLBCL）免疫学亚型：生发中心B细胞样(germinal centerB-cell like,GCB)亚型与非生发中心B细胞样(non-germinal centerB-cell like,non-GCB)亚型在新疆维吾尔族DLBCL中的分布；2）研究凋亡及耐药在新疆维吾尔族DLBCL不同免疫学亚型的中的作用及意义；3）探讨PI3K/Akt/mTOR信号转导通路在新疆维吾尔族DLBCL中的作用及意义。
　　方法：1）采用免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）方法检测CD10、bcl-6、MUM1、GCET1和FOXP1在维吾尔族DLBCL中的表达。维吾尔族DLBCL免疫学亚型按Choi法则进行；2）采用流式细胞仪检测维吾尔族DLBCL不同亚型中细胞凋亡率；3）采用western blot法检测凋亡相关蛋白（bcl-2、bcl-xL、bax、survivin）在维吾尔族DLBCL中的表达；4）采用RT-PCR方法检测维吾尔族DLBCL中耐药基因MRP1的表达情况；5）采用western blot法检测p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白在维吾尔族DLBCL中的表达；6）采用Kaplan-Meier法进行生存分析，Cox比例风险模型分析影响预后的因素。
　　结果：1）新疆维吾尔族 DLBCL患者中non-GCB型DLBCL所占比例显著高于GCB型DLBCL所占比例（70％vs30%，P＜0.05）。新疆维吾尔族non-GCB组DLBCL的预后较GCB组DLBCL患者预后差（42.1%%vs74.5，P＜0.05）。Ann Arbor分期、IPI、结外病变数及Choi免疫学分型与维吾尔族DLBCL患者的预后相关（P＜0.05），而Ann Arbor分期、IPI评分及Choi免疫学分型是新疆地区维吾尔族DLBCL患者的独立预后因素（P＜0.05）；2）新疆维吾尔族non-GCB组和GCB组的凋亡率分别为：43.08±9.72%、56.17±6.88%，其差异具有统计学意义（P＜0.05）；3）bcl-2蛋白在 GCB组与 non-GCB组的阳性率分别为16.67%、50%，两组的表达差异具有统计学意义（P=0.016）；Survivin在GCB组和non-GCB组中的阳性表达率分别为27.8%、66.7%，其表达差异无统计学意义（P=0.009），而Bax与bcl-xL在GCB组和non-GCB组中的阳性表达差异无统计学意义（P＞0.05）；4）bcl-2蛋白表达阴性组与阳性组的3年总生存（overall survival，OS）率分别为61.8%、33.3%，其差异具有统计学意义（P=0.039）；Survivin表达阴性组与阳性组的OS率分别为70.4%、32.6%，其差异具有统计学意义（P=0.013），而Bax与bcl-xL蛋白表达阴性组与阳性组的3年OS率无统计学意义（P＞0.05）；5） MRP1mRNA在GCB组与non-GCB组的阳性率分别为33.3%、66.7%，两组的表达差异具有统计学意义（P=0.017）；MRP1基因扩增阴性组与MRP1基因扩增阳性组患者的3年OS分别为72.9%、30.4%，其差异具有统计学意义（P=0.006）；6）p-AKt及p-mTOR在维吾尔族GCB型DLBCL与non-GCB型DLBCL中的表达差异具有统计学意义（P＜0.05），而p-PI3K在维吾尔族GCB型DLBCL与non-GCB型DLBCL中的表达差异无统计学意义（P＞0.05）；7）p-Akt的表达仅与维吾尔族 DLBCL患者的年龄相关（P＜0.05），而与其他临床特征无显著相关（P＞0.05），p-mTOR则与维吾尔族DLBCL患者的临床特征无显著相关（P＞0.05）；8）p-AKt的表达与Bcl-2表达显著相关（P＜0.05），而 p-PI3K及p-mTOR的表达与Bcl-2表达无显著相关（P＞0.05）；p-AKt及p-mTOR的表达与survivin表达显著相关（P＜0.05）而p-PI3K的表达与 survivin表达无显著相关（P＞0.05）；9）p-AKt及 p-mTOR的表达与MRP1mRNA的扩增显著相关（P＜0.05），而 p-PI3K的表达与 MRP1mRNA的扩增无显著相关（P＞0.05）；10）p-mTOR表达阴性组与阳性组的3年OS率分别为72%、33.8%，其差异具有统计学意义（P=0.01），而p-PI3K及p-AKt的表达与维吾尔族DLBCL患者的生存无显著相关（P＞0.05）。
　　结论：1）新疆维吾尔族DLBCL患者可能大多属于non-GCB型DLBCL（Choi分类法），新疆维吾尔族non-GCB组DLBCL的预后可能较GCB组DLBCL患者预后差；临床分期、IPI评分及Choi免疫学分型可能是新疆地区维吾尔族DLBCL患者的独立预后因素；2）新疆维吾尔族DLBCL患者的不同免疫学亚型可能具有不同的凋亡及耐药特征。Bcl-2、survivin及MRP1结合免疫学分型可以考虑作为新疆维吾尔族DLBCL患者的预后参考指标；3） PI3K/Akt/mTOR信号传导通路可能参与了新疆维吾尔族 DLBCL的凋亡及耐药调控；4）PI3K/Akt/mTOR信号传导通路可能参与了新疆维吾尔族DLBCL不同免疫学亚型的发病。

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前言

第一部分新疆维吾尔族弥漫大B细胞淋巴瘤免疫学亚型的研究

1 研究内容与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第二部分新疆维吾尔族弥漫大B细胞淋巴瘤不同免疫学亚型抗凋亡及耐药性研究

1 研究内容与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

第三部分新疆维吾尔族弥漫大B细胞淋巴瘤PI3K/Akt/mTOR信号转导的相关性研究

1 研究内容与方法

2 结果

3 讨论

4 小结

结论

致谢

参考文献

综述

攻读博士学位期间获得的学术成果

个人简历

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