贝伐单抗肝动脉灌注对大鼠肝泡状棘球蚴病VEGF及免疫耐受影响的研究

摘要

目的：建立大鼠经股动脉穿刺超选择性肝动脉插管模型，观察肝动脉灌注(Hepatic arterial infusion，HAI)贝伐单抗介入治疗大鼠肝泡状棘球蚴病，并与对照组的疗效、血浆血管内皮生长因子VEGF生成的动态改变，及HAE病灶边缘带的影响。
　　方法：复制大鼠肝泡状棘球蚴病模型，B型超声筛选50只成功接种HAE模型的清洁级雌性Wistar大鼠分为2组，对照组10只，分别在术后第7天、14天、21天、28天鼠尾静脉取血，第28天安乐死；实验组40只，对照组第一天生理盐水经肝动脉注射，实验组第一天贝伐单抗经肝动脉注射，分别为术后第7天、第14天、第21天、第28天处死组，收集血清学及病理学样本，ELASA测血清VEGF及门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)，HE染色了解基本病理变化，SP免疫组化法检测VEGF-a、LYVE-1、FoxP3+Treg，了解贝伐单抗对对大鼠HAE的血管、淋巴管生成及免疫状态的影响。
　　结果：1、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)术后7天一过性的升高，后逐渐降低，直至恢复至基本正常。2、大鼠血浆中VEGF表达剂量在术后7天开始降低,与术前及对照组比较差异有统计学意义(P=0.019)，术后14d实验组血浆中VEGF表达量持续下降，其中第14d下降最低，至与术前比较差异有统计学意义(P=0.003及P=0.000)，术后21d逐渐上升，28d恢复至正常水平，与术前及对照组相比;免疫组化显示 HAE边缘带 VEGF与血清学基本一致。3、免疫组化显示LYVE-1标记的微淋巴管密度在术前及术后没有明显变化；FoxP3+标记的Treg Cell在术后逐渐降低。4、贝伐单抗介入治后HAE病灶以变形为主，少部分发生明显坏死，表明贝伐单抗介入治抑制HAE的快速的生长；
　　结论：1、贝伐单抗介入治疗 HAE技术简单易行，安全可靠，可以提高大鼠泡状棘球蚴病介入治疗药物研究的准确性与可靠性。2、贝伐单可以抑制HAE血清及边缘带VEGF的表达剂量，间接表明对 HAE生长的抑制作用。3、经贝伐单抗介入治疗的泡状棘球蚴病大鼠的免疫抑制状态在一定情况下改变。

目录

封面

声明

中英文缩略词对照表

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中文摘要

英文摘要

前言

研究内容与方法

1研究对象

2主要试剂、仪器和耗材

3实验方法

4统计学分析

5技术路线图

结果

1B超引导下肝泡状棘球蚴病的接种及筛查

2贝伐单抗肝动脉灌注对大鼠肝功能的影响

3VEGF的表达

4泡球蚴织结构病理学及免疫组化观察

讨论

1大鼠肝泡状棘球蚴模型拷贝及筛查中B超的价值

2肝泡状棘球蚴病治疗现状及治疗相关问题

3肝泡球蚴病的营养

4介入治疗的可行性探索

5贝伐单抗在本实验中的价值

6 HAE淋巴管及免疫耐受存在的现实

7贝伐单抗介入治疗对大鼠肝功能的影响

8实验综合分析

9实验中存在的不足

小结

致谢

参考文献

附录一

附录二

附录三

综述

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