维药没食子质量控制及对变异链球菌抑制作用的研究

摘要

目的：通过研究维药没食子药材的质量标准评价、三种化学成分的定性定量分析、微量元素的含量测定以及没食子药材对变异链球菌活性的影响，为维药没食子的质量控制提供可靠的科学依据和研究方法，使维药没食子药用资源得到广泛的开发和利用。
　　方法：根据2015版《中华人民共和国药典》和查阅大量文献对没食子药材进行性状鉴定；对没食子药材粉末进行显微鉴别；对没食子水提取液、乙醇提取液和石油醚提取液进行系统预实验；检查10批没食子药材中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物和醇溶性浸出物的含量；使用紫外分光光度计测定10批没食子提取液中的总多酚含量；采用薄层色谱法（TLC）对10批没食子药材中没食子酸、没食子酸甲酯、鞣花酸三种主要化学成分进行定性分析，并采用高效薄层色谱法（HPTLC）测定10批没食子药材中没食子酸、没食子酸甲酯和鞣花酸的含量，对其化学成分进行定量研究；应用薄层色谱-生物自显影技术筛选10批没食子药材中的抗氧化活性成分并比较不同批次没食子药材的抗氧化能力；利用高效液相色谱法（HPLC）测定10批没食子药材中没食子酸、没食子酸甲酯和鞣花酸的含量；采用原子荧光法（AFS）测定10批没食子药材中的砷、汞的含量；采用电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）测定10批没食子药材中的铜的含量；采用石墨炉原子吸收法测定10批没食子药材中的铅、镉的含量；采用96孔微孔板法研究10批没食子药材抑制变异链球菌活性的影响。
　　结果：维药没食子提取液中可能含有多肽、蛋白质、糖、多糖、苷类、有机酸、酚类、鞣质等成分；10批没食子药材中的水分平均值为9.18％、总灰分平均值为1.62%、酸不溶性灰分平均值为0.12%、水溶性浸出物平均值为71.22%、醇溶性浸出物平均值为76.24%；10批没食子药材提取液中总多酚含量在513.7549-724.5982 mg/g之间；薄层色谱分析最优固定相选择安徽良辰硅胶GF254高效板，最优流动相选择为甲苯-乙酸乙酯-甲酸（6:4.5:2），10个批次的没食子薄层色谱中所含成分基本一致，但不同批次间含量有所差异，没食子酸、没食子酸甲酯和鞣花酸的含量平均为2.8397、3.6146、3.1664 mg/g；应用薄层色谱-生物自显影技术筛选10批没食子药材中的抗氧化活性成分，发现没食子药材中含有至少四种抗氧化活性成分，其中包括没食子酸、没食子酸甲酯、鞣花酸，并且不同批次之间抗氧化能力均有不同；HPLC法测定10批没食子药材中没食子酸、没食子酸甲酯、鞣花酸的含量平均为50.0086、119.8675、14.3981 mg/g；10批没食子药材中砷、汞、铜、铅、镉的含量分别在0.0707-0.1959、0.1012-0.1652、3.7467-12.4358、0.0098-0.0855、0.0048-0.0176μg/g之间；10批没食子药材对变异链球菌的生长及变异链球菌生物膜的形成均有一定的抑制作用，且不同批次的没食子药材，其抑制率不相同。
　　结论：本研究对维药没食子进行了性状鉴定、显微鉴别、系统预实验，检查了10批没食子药材中的水分、总灰分、酸不溶性灰分、水溶性浸出物和醇溶性浸出物；测定10批没食子提取液中的总多酚含量；采用高效薄层色谱法测定10个批次没食子药材中没食子酸、没食子酸甲酯、鞣花酸的含量，并采用薄层色谱-生物自显影技术筛选10批没食子药材中的抗氧化活性成分，是一种集分离与活性测定为一体的药物筛选方法，并与薄层指纹图谱结合，从谱效关系的角度来看，为没食子的质量控制提供可靠的科学依据；采用HPLC法测定10批没食子药材中没食子酸、没食子酸甲酯、鞣花酸的含量；测定了没食子药材中微量元素的含量。为建立科学的没食子质量标准提供科学依据，使没食子药用资源得到广泛的开发和利用。同时，采用96孔微孔板法初步研究没食子药材抑制变异链球菌活性，为更深一步的研究奠定了基础。

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前言

研究内容与方法

第一部分 没食子质量评价初步研究

1.1 实验材料

1.2 方法与步骤

1.3 结果与分析

1.4 讨论

第二部分 维药没食子中总多酚的含量测定

2.1 实验材料

2.2 方法与步骤

2.3 结果与分析

2.4 讨论

第三部分 没食子药材化学成分的薄层色谱分析

3.1 实验材料

3.2 方法与步骤

3.3. 结果与分析

3.4 讨论

第四部分 HPLC法测定没食子中没食子酸、没食子酸甲酯和鞣花酸的含量

4.1 实验材料

4.2 方法与步骤

4.3 结果与分析

4.4 讨论

第五部分 没食子药材中微量元素的含量测定

5.1 实验材料

5.2 方法与步骤

5.3 结果与分析

5.4 讨论

第六部分 没食子提取物抑制变异链球菌实验的初步研究

6.1 实验材料

6.2 方法与步骤

6.3 结果与分析

6.4 讨论

第七部分 维药没食子质量标准（草案）

小结

致谢

参考文献

综述:维药没食子的研究进展

攻读硕士学位期间发表的学术论文

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