转化生长因子-β3对兔牙髓干细胞增殖及骨向分化的影响

摘要

目的：探讨TGF-β3对体外培养的兔牙髓干细胞增殖和分化的影响。
　　方法：采用酶解组织块法将兔DPSCs分离培养，获得DPSCs，光镜下行形态学观察；将体外培养的第3代DPSCs分为5组，分别为对照组、20 ng/mL TGF-β3组、40 ng/mL TGF-β3组、80 ng/mL TGF-β3组和100 ng/mL TGF-β3组，分别加入0、20、40、80、100 ng/mL TGF-β3；采用MTT法检测5组DPSCs A490值，采用免疫细胞化学法检测成骨细胞标记物 OC、COL-I、BSP表达情况，采用茜素红染色检测出现矿化结节情况，并进行比较。
　　结果：兔DPSCs呈集落状生长，在体外有一定克隆形成能力；对照组、20、40、80、100 ng/mL TGF-β3组兔DPSCs A490值分别为0.34±0.55、0.34±0.19、0.33±0.47、0.33±0.30、0.34±0.47，各组间两两比较差异均无统计学意义（P>0.05）；80、100 ng/mL TGF-β3组诱导后第3天出现COL-I阳性表达，第7天开始消失，第5～7天出现BSP阳性表达，第7～14天出现OC阳性表达，第7天出现矿化结节；40 ng/mL TGF-β3组第5～7天均有COL-I阳性表达，第7天出现BSP阳性表达，第14天出现OC阳性表达，第14天出现矿化结节；20 ng/mL组第7天出现COL-I阳性表达，第14天消失，第14天出现BSP阳性表达，第21天出现OC阳性表达，第21天出现矿化结节；对照组COL-I、BSP和OC均为阴性，未出现矿化结节。
　　结论：TGF-β3对体外培养的兔DPSCs增殖无影响，但对兔DPSCs向成骨细胞分化能力有一定促进作用，并在一定范围内呈浓度依赖关系。

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封面

声明

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中文摘要

英文摘要

前言

内容与方法

1 研究对象及目的

2 主要试剂、仪器及试剂的配制

3 兔牙髓干细胞的分离、培养

4 兔牙髓干细胞形态学观察

5 兔牙髓干细胞增殖实验

6 免疫细胞化学染色鉴定干细胞骨向分化情况

7 茜素红染色

8 质量控制

9 统计学分析

10 技术路线图

结果

1 细胞形态学观察

2 TGF-β3对牙髓干细胞增殖的影响

3 免疫细胞化学检测成骨相关蛋白表达情况

4 茜素红染色检测矿化结节形成能力

讨论

1 牙髓干细胞在骨组织工程方面的应用

2 TGF-β的生物学功能

3 兔牙髓干细胞的分离培养

4 TGF-β3对牙髓干细胞增殖的影响

5 细胞成骨的检测

6 免疫细胞化学检测成骨相关蛋白表达情况

7 茜素红染色检测矿化结节形成能力

小结

致谢

参考文献

附录

综述:牙髓干细胞在口腔颌面部缺损的应用研究

硕士学位期间发表的学术论文

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