N离子束诱变苜蓿突变体高效再生体系的研究

摘要

实验采用35keV的N<'+>离子束0～12×10<'16>N<'+>/cm<'2>剂量处理，两个苜蓿品种(新牧1号杂花苜蓿、新疆大叶紫花苜蓿)种子，以下胚轴为外植体，研究了两个苜蓿品种的组织培养程序，建立了N<'+>离子束诱变苜蓿突变体高效再生体系，为提高苜蓿转基因效率提供良好的突变体受体材料和实验参考数据。研究结果如下： (1) 建立了两品种不同激素浓度诱导的再生体系，结果如下：①诱导培养基：新牧1号杂花苜蓿：MS+2,4-D2mg/L+NAA4mg/L+6-BA1mg/L，出愈率可达到94﹪，新疆大叶紫花苜蓿：MS+2，4-D2mg/L+NAA8mg/L+6-BA1mg/L，出愈率可达到92.3﹪；②增殖培养基：新牧1号杂花苜蓿：MS+2,4-D2mg/L+NAA4mg/L+6-BA1mg/L+ABA1 mg/L+KT2mg/L+LH400mg/L，愈伤增长速度可达到1.86mm，新疆大叶紫花苜蓿： MS+2，4-D2mg/L+NAA8mg/L+6-BA1mg/L+ABA1mg/L+KT2mg/L+LH0mg/L，其中蔗糖4﹪，琼脂0.7﹪，愈伤增长速度为2.05mm：⑨分化培养基：MS+NAA0.5mg/L+6-BA0.1mg/L+KT1mg/L，其中琼脂为0.8﹪，蔗糖为3﹪，新牧1号杂花苜蓿的分化率为16.67﹪，新疆大叶紫花苜蓿的分化率为34.78﹪；④生根培养基：1/2MS，其中琼脂0.7﹪，蔗糖2﹪。 (2)建立了N<'+>离子束诱变苜蓿的突变体高效再生体系，结果如下：①新牧1号杂花苜蓿和新疆大叶紫花苜蓿的半致死剂量均为12×10<'16>N<'+>/cm<'2>；②当剂量为12×10<'16>N<'+>/cm2时，新牧1号杂花苜蓿和新疆大叶紫花苜蓿的体细胞胚分化强度分别是对照(CK)的44.55﹪N 72.14﹪，小植株的形成强度分别是对照(cK)的40.00﹪和38.98﹪；③实验共筛选出14个具有高效再生能力的基因型，其中新牧1号杂花苜蓿有4个，新疆大叶紫花苜蓿有10个，其再生苗均在土壤中移载成功，并生长良好。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：英文缩略语

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引 言

第一部分文献综述

第一章苜蓿突变体高效再生体系研究进展

1人工诱变育种技术在植物育种中的应用研究概况

2物理诱变育种概况

3化学诱变育种概况

4诱变育种的研究方向

第二部分试验及结果

第一章不同激素浓度诱导苜蓿愈伤组织的研究

前言

1材料和方法

2结果与分析

3结论

4 讨论

第二章N+离子束诱变苜蓿突变体高效再生体系的研究

前言

1材料和方法

2结果与分析

3结论

4讨论

参考文献

致谢

作者简介

附录