榅桲的组织培养快繁及耐盐性研究

摘要

本研究以新疆苹果型(木日皿)（木十字）为试材，研究了(木日皿)（木十字）的茎段及子叶组织培养快繁途径，分别采用(木日皿)（木十字）组培苗和种子对其耐盐性作了初步探讨。组培快繁试验中分别研究了不同灭菌剂、灭菌时间、培养基、激素组合等对(木日皿)（木十字）外植体灭菌、初代培养、继代培养和生根培养的影响。耐盐性研究中，探讨了不同盐种类、不同盐浓度及不同盐胁迫时间对(木日皿)（木十字）组培苗生长性状、生理指标的影响。同时也研究了上述盐胁迫因素对(木日皿)（木十字）种子萌发情况、酶活性和离子分布的影响。分析结果表明： 1)用(木日皿)（木十字）茎段进行组培快繁研究中，0.1％升汞溶液消毒5min，灭菌效果最好；初代培养基以Ms+6-BA0.6mg/L效果较好，萌芽率和增殖倍数均较高，分别为93.3％和4.7；继代培养基以MS+6-BA0.6mg/L+IBA0.2mg/L和Ms+6-BA0.6mg/L+IBA0.4mg/L组合交替使用更有利于组培苗的增殖和壮苗；生根培养基以1/2MS(I)+NAA1.0mg/L生根率最高，达50％，平均根数为7-10根。短时间(7d)暗培养对诱导(木日皿)（木十字）苗生根有利，随着暗培养天数的增加叶焦边现象逐渐加重，甚至出现顶端枯死现象；6-BA对诱导(木日皿)（木十字）组培苗生根无益且易出现畸形叶。 2)在(木日皿)（木十字）成熟胚子叶不定植株再生研究中，1/4MS(I)+6-BA5mg/L+NAA0.5mg/L组合诱导成熟胚子叶芽分化效果最好，芽分化率可达77.5％；继代培养基以MS+6一BA 0.6mg/L+IBA0.2mg/l。效果较好，增殖倍数约达4倍；生根培养基以速蘸IBA50mg/L 3s后接入活性炭培养基中生根率最高为75％，根数较多，但根生长缓慢，30d平均根长还不到1cm。移栽炼苗采用培养室培养钵炼苗法，以锯末为介质，15d左右长出新根，30d后成活率为78％。 3)组培苗耐盐性研究中，萌芽率、增殖倍数、平均株高均随着盐浓度的增大而降低，膜透性和盐害率随着盐浓度的增大而升高。三种保护酶SOD、CAT、POD活性除POD活性随着Na2SO4浓度的增加降低外，其它均随着盐浓度的增人呈先上升后下降趋势。NaCl胁迫下叶绿素a、b和总叶绿素含量的变化趋势相同，均呈下降一升高一下降趋势，但始终在空白处理时最高，最人盐浓度时最低。Na2SO4胁迫下叶绿素a和总叶绿素含量的变化趋势相同，呈下降趋势，叶绿素b与之不同，呈先升高后下降趋势。类胡萝卜素的含量变化没有规律性。认为，萌芽率、增殖倍数、平均株高、膜透性、盐害率、SOD、CAT、POD活性均可作为鉴定(木日皿)（木十字）耐盐性评价指标，叶绿素可作为抗盐评价的参考指标。两种盐胁迫下，(木日皿)（木十字）组培苗更能耐受NaCl胁迫，NaCl和Na2SO4分别在浓度为0.6％和0.8％时开始对(木日皿)（木十字）组培苗造成严重伤害，在0.8％和1.0％时至死率超过50％。 4)(木日皿)（木十字）种子耐盐性研究中，随着盐浓度的增大，发芽率和成苗率均呈下降趋势。NaCl胁迫时，SOD、CAT活性均随着盐浓度的增人呈先上升后下降趋势，POD；活性呈上升趋势。Na2SO4胁迫时，随着盐浓度的增大POD、CAT活性呈先上升后下降趋势，SOD活性呈降低趋势。所以认为，不同种类盐胁迫下，(木日皿)（木十字）种子的耐盐机制不同。随着盐浓度的增大，芽苗和培养基中的Na+均呈上升趋势，种皮中的Na+呈先下降后上升趋势。K在各组织中的变化没有规律性。NaCl胁迫下，随着盐浓度的增加，芽苗和种皮中Na'/K'呈升高一降低趋势，但始终高于空白处理中Na'/K'的值，培养基中Na'/K'呈升高一降低一升高趋势。Na2SO1胁迫时芽苗和种皮中Na+/K+呈升高-降低-升高趋势，培养基中Na+/K+呈升高趋势。综合分析，发芽率、成茁率、SOD、CAT、POD、(木日皿)（木十字）芽苗中Na+含量可作为(木日皿)（木十字）种子耐盐性评价指标。K+、Na+/K+变化较复杂，能否作为(木日皿)（木十字）种子耐盐性鉴定的指标还有待于研究。Na2SO4胁迫对(木日皿)（木十字）种子发芽的影响比NaCl胁迫大。以盐胁迫浓度对榀桴种子发芽率和成苗率为标准来看，Na2SO4和NaCl浓度分别为100mmol和150mmol时严重影响(木日皿)（木十字）种子发芽。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：缩略词

声明

引言

第一章文献综述

1植物组培快繁的研究进展

1.1植物组织培养相关概念、意义及特点

1.2建立无菌外植体

1.3培养条件对组培苗生长的影响

1.4驯化和移栽

1.5存在的问题

2果树耐盐性研究进展

2.1盐碱地分布情况

2.2盐碱土成分

2.3植物盐害机理

2.4不同果树种质资源的耐盐性

2.5盐胁迫对果树生长性状的影响

2.6盐胁迫对果树生理生化特性的影响

3国内外榅桲的研究现状及其研究意义

第二章榅桲茎段组织培养的研究

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1不同灭菌剂及灭菌时间对无菌外植体建立的影响

2.2不同基本培养基及6-BA浓度对榅桲初代培养的影响

2.3不同激素组合对榅桲继代培养的影响

2.4不同生长素及浓度对榅桲生根培养的影响

2.5暗培养和6-BA对榅桲生根的影响

3小结与讨论

第三章榅桲成熟胚子叶不定植株再生研究

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1不同培养基组合对榅桲成熟胚子叶芽分化的影响

2.2不同激素组合对榅桲继代培养的影响

2.3不同培养方法及培养基对榅桲生根培养的影响

2.4驯化移栽

3小结与讨论

第四章榅桲组培苗的耐盐性研究

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1不同盐胁迫对组培苗生长指标的影响

2.2不同盐胁迫处理对榅桲组培苗膜透性的影响

2.3不同盐胁迫处理对榅桲组培苗SOD活性的影响

2.4不同盐胁迫处理对榅桲组培苗POD活性的影响

2.5不同盐胁迫处理对榅桲组培苗CAT活性的影响

2.6不同盐胁迫处理对榅桲组培苗叶绿素的影响

3小结与讨论

3.1榅桲组培苗耐盐性与生长指标的关系

3.2榅桲组培苗耐盐性与膜透性的关系

3.3榅桲组培苗耐盐性与保护酶活性的关系

3.4榅桲组培苗耐盐性与叶绿素含量的关系

第五章不同盐处理对榅桴种子萌发、酶活性及无机离子的影响

1材料与方法

1.1材料

1.2方法

2结果与分析

2.1盐胁迫对榅桲种子发芽率及成苗率的影响

2.2盐胁迫对榅桲种子发芽时POD活性的影响

2.3盐胁迫对榅桲种子发芽时SOD活性的影响

2.4盐胁迫对榅桲种子发芽时CAT活性的影响

2.5盐胁迫时间对榅桲种子发芽率的影响

2.6盐胁迫对榅桲种子发芽时芽苗中Na+、K+的影响

2.7盐胁迫对榅桲种子发芽时种皮中Na+、K+的影响

2.8盐胁迫对榅桲种子发芽时培养基中Na+、K+的影响

2.9盐胁迫对榅桲种子发芽时各组织中Na+、K+的影响

3小结与讨论

3.1榅桲种子耐盐性与种子萌发的关系

3.2榅桲种子耐盐性与保护酶活性的关系

3.3榅桲种子耐盐性与Na+、K+分布的关系

第六章结论

参考文献

附录

致谢

作者简历

附：在学期间发表论文