新疆北疆部分集约化奶牛场牛病毒性腹泻病毒分子流行病学调查

摘要

为了解北疆地区牛病毒性腹泻病毒的感染状况，以及BVDV的基因型的分布。从新疆北部奶牛场中采集牛全血、抗凝血及直肠粘膜。利用新疆农垦科学院牛病毒性腹泻病毒标准化(BVDV)抗原捕获ELISA检测试剂盒检测粘膜中的牛病毒性腹泻病毒，采集样品192头份，576份，平均阳性率为35.4％；样品的阳性率在发病牛场为100％，看似正常牛场的检出率0-57.9％不等；正常牛场的平均阳性率为23.5％。 根据牛病毒性腹泻病毒的标准毒株NADL的5’-UTR保守区设计引物，用RT-PCR方法检测牛血液的牛病毒性腹泻病毒。目的片断回收克隆测序，并用DNAMAN,Primer等生物信息学软件分析，作出新疆北部地区奶牛的牛病毒性腹泻病毒的系统进化树；根据标准毒株NADL的5’-UTR保守区设计分型引物，并用RT-PCR方法鉴定其基因型，结果新疆北部地区所采集的样品均为BVDV-Ⅰ型。 培养胎牛肾细胞(MDBK)，将挑取的阳性样品的牛血液经反复冻融，离心处理后，过滤除菌接入长满单层的MDBK细胞，经连续盲传四代后，判断采集样品的生物型，结果：所有选取的样品均未致细胞病变。生物型为非致细胞病变型(ncp)。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：中英文缩略表

声明

第一章文献综述

一BVDV研究的发展历程

1对牛病毒性腹泻的临诊症状和病理表现的了解的历史过程

3 RNA病毒中基因不稳定的重要性

二牛病毒性腹泻病毒流行病学研究进展

第二章 实验研究

实验一新疆北疆部分集约化奶牛场牛病毒性腹泻病毒的血清学调查

1材料与方法

2结果

3讨论

实验二新疆北疆部分集约化奶牛场牛病毒性腹泻病毒生物型鉴定

1材料与方法

2方法细胞培养，样品处理与病毒增殖

4讨论

实验三新疆北部地区牛病毒性腹泻的基因型鉴定

1材料与方法

2结果

3讨论

实验四牛病毒性腹泻的遗传进化分析

1材料与方法

2结果

3讨论

第三章结论

参考文献

附录

作者简介

致谢

石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表