新疆维吾尔族子宫颈癌患者组织与血浆中MGMT基因启动子甲基化检测及临床意义

摘要

目的：检测新疆维吾尔族妇女子宫颈鳞癌组织MGMT基因启动子甲基化状况，确定MGMT基因启动子甲基化与子宫颈癌发生、病理组织分级、淋巴结转移及临床分期的相关性，并为子宫颈癌的临床个性化治疗提供参考。检测新疆维吾尔族妇女子宫颈癌患者血浆中MGMT基因启动子甲基化状况，为临床子宫颈癌基因诊断探寻一种简便、无创的诊断方法。 方法：收集2005年1月至2007年6月维吾尔族妇女子宫颈鳞癌患者组织86例(其中冰冻新鲜组织61例，石蜡包埋组织25例)及与正常子宫颈组织38例(冰冻新鲜组织)，收集2007年1月至9月维吾尔族妇女子宫颈鳞癌患者血浆43例与正常维吾尔族妇女体检者血浆40例，应用甲基化特异性PCR检测患者组织与血浆中MGMT基因的甲基化异常，并应用半定量RT-PCR检测子宫颈鳞癌及正常宫颈组织中MGMT基因mRNA表达水平。 结果： (1)维吾尔族子宫颈鳞癌组织MGMI基因启动子甲基化率31％(27/86)与维吾尔族正常子宫颈组织中的MGMT甲基化率0％(0/38)有统计学差异(P<0.005)。维吾尔族子宫颈鳞癌患者血浆中MGMT甲基化率26％(11/43)与维吾尔族正常人血浆中的MGMT甲基化率0％(0/40)有统计学差异(P<0.005)。 (2)新鲜冰冻鳞癌组织甲基化率为31％(19/61)，石蜡包埋鳞癌组织甲基化率为32％(8/25)，鳞癌患者血浆甲基化率为26％，三者无统计学差异(P>0.05)。 (3)子宫颈高分化鳞癌甲基化率为20％(1/5)，中分化鳞癌甲基化率为38％(6/16)，低分化鳞癌甲基化率为33％(4/12)，差异无统计学意义(P>0.05)。 (4)临床分期低级阶段(原位癌和临床I期)MGMT基因启动子甲基化的发生率(15％，2/13)与临床分期高级阶段(临床Ⅱ期和Ⅲ期)(36％，17/47)相比较低，但统计学差异没有显著性(P>0.05)。 (5)淋巴结转移组MGMT基因启动子甲基化发生率43％(3/7)高于淋巴结未转移组24％(5/21)，但统计学差异无显著性(P>0.05)。 (6)与非甲基化鳞癌及正常子宫颈组织相比，MGMT基因启动子甲基化的鳞癌组织其基因mRNA表达水平明显降低或缺失。 结论：(1)MGMT基因启动子区甲基化导致该基因mRNA表达水平降低可能部分参与了维吾尔族子宫颈癌的发生，且可能与维吾尔族宫颈癌的淋巴结转移、组织病理分级及临床分期不相关。 (2)在维吾尔族妇女鳞癌患者血浆游离DNA中MGMT基因启动子区甲基化与鳞癌组织中相近，提示鳞癌患者血浆中MGMT基因的甲基化检测可能作为一种方便、无创的手段代替鳞癌组织基因甲基化检测。

目录

文摘

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论文说明：主要符号、缩略词、术语等注释说明表

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前言

第一章材料和方法

1材料

1.1标本来源

1.2主要试剂

1.3主要仪器设备

2方法

2.1甲基化特异性PCR进行组织及血浆游离DNA甲基化检测

2.2T-A克隆测序分析基因启动子区甲基化

2.3半定量RT-PCR验证启动子区甲基化与非甲基化组织MGMT基因转录水平

2.4统计学分析

第二章结果

第三章讨论

第四章结论

参考文献

文献综述抑癌基因MGMT与肿瘤的发生、诊断和治疗

附录

致谢

作者简历