大型真菌菌丝体分离、培养及其rDNA ITS分子鉴定研究

摘要

目的：对新疆大型真菌资源进行调查研究，为保护大型真菌的多样性和人工栽培提供理论基础。 方法：探索新疆局部地区大型真菌的物种多样性，对部分大型真菌特别是野生食用菌进行组织培养、分离菌丝体，并对菌丝体的固体和液体培养配方进行了优化；从形态学特征上把大型真菌进行了分类，并对其经济价值进行了评估；结合形态学观察，利用rDNA ITS区段的DNA序列对子实体和分离得到的菌丝体进行物种鉴定；最后对菌丝体进行了栽培初探。 结果：⑴博乐蘑菇（BL）子实体和菌丝的ITS序列长度都为745bp，经组织培养获得的菌丝是纯菌丝。⑵对乌鲁木齐和哈密的羊肚菌资源进行了调查，最终从形体上挑选了4个羊肚菌子实体，同时从四川绵阳某研究所购得一株高羊肚菌菌种做为实验对照。经测序的ITS分析可知从形体上挑选的3个哈密羊肚菌子实体序列相同，长度为734bp。乌鲁木齐南山羊肚菌子实体ITS序列长度为738bp；从四川绵阳某研究所购得的羊肚菌菌丝ITS长度为737bp。⑶对哈密巴里坤军马场地区的大型真菌进行了资源调查，获得了91种形态株，根据形态学特征初步鉴定出了37株，组织培养得到26株菌丝。有55个子实体和22个菌丝的测序信号较好，分子鉴定证明9株菌丝为纯菌丝。出菇实验没有获得预期效果。 结论：①结合形态学特征以双胞蘑菇（AB）为对照，以野蘑菇为外类群利用NJ法构建的亲缘关系树显示博乐蘑菇归属为双环蘑菇较为合理。②以形态学特征、地理分布规律和BLAST分析结果，以圆锥钟菌为外类群，选取羊肚菌，粗柄羊肚菌，黑脉（小顶）羊肚菌，尖顶羊肚菌，高羊肚菌，肋脉羊肚菌6个品种构建系统进化树显示哈密巴里坤羊肚菌和乌鲁木齐南山羊肚菌属于Morchella costata类群。证明哈密和乌鲁木齐羊肚菌形态学上的差异是由于环境或发育不同阶段的差异造成的。③部分形态株给出了具体命名，尚不能确定的给出属名或暂命名为Uncultured fungus。

目录

文摘

英文文摘

声明

前 言

文献综述

1大型真菌的多样性

2大型真菌的鉴定

3本研究的目的及意义

第一章 新疆的大型真菌物种多样性

1研究区概况

2材料和方法

3结果与分析

第二章 大型真菌菌丝体培养

1实验材料

2实验方法

3结果与分析

第三章 大型真菌rDNA ITS分子鉴定

1实验材料

2基本实验方法

3结果与分析

第四章 大型真菌栽培初探

1实验材料

2实验方法

3结果与分析

总结

参考文献

致谢

附录：

作者简介