C/EBPα和C/EBPβ基因影响子宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的研究

摘要

目的：通过研究C/EBPα和C/EBPβ基因对子宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭能力的的影响，对深入了解其在子宫颈癌发生、发展过程中的作用提供新的线索，为子宫颈癌的诊断、治疗提供新的靶点和研究方向。
　　方法：1、分别抽提C/EBPα和C/EBPβ质粒，然后用脂质体法分别转染到子宫颈癌HeLa细胞。2、应用免疫荧光方法评价C/EBPα和C/EBPβ蛋白质表达水平。3、实验按干预因素不同分重组质粒组（转染pcDNA3.1-C/EBPα的HeLa细胞）、重组质粒组（转染pcDNA3.1-C/EBPβ的HeLa细胞）、空质粒组（转染pcDNA3.1的HeLa细胞）、对照组（未转染质粒的HeLa细胞）、用免疫组织化学的方法检测各组核蛋白Ki-67观察细胞增殖情况、用MTT观察细胞增殖情况、基质胶侵袭实验分析细胞迁移能力、扫描电子显微镜下观察细胞形态。
　　结果：1、免疫荧光结果显示：重组质粒组荧光蛋白质表达含量明显高于空质粒组和对照组，而空质粒组和对照组蛋白表达无差异。2、免疫组化Ki-67结果显示：重组质粒组Ki-67蛋白表达明显低于空质粒组和对照组，而空质粒组和对照组Ki-67蛋白表达无显著差异。3、MTT结果显示：重组质粒组增殖率明显低于空质粒组和未转染HeLa细胞组。转染C/EBPα组的吸光度值为0.21±0.01，转染空质粒组的吸光度值为0.24±0.01，未转染组的吸光度值为0.24±0.02，转染重组质粒组与空质粒组和未转染组比较差异有统计学意义（F=17.219，P=0.000），空质粒组和未转染组比较无统计学意义（P=0.155)。转染C/EBPβ组的吸光度值为0.38±0.12，转染空质粒组的吸光度值为0.59±0.17，未转染组的吸光度值为0.68±0.17，转染重组质粒组与空质粒组和未转染组比较差异有统计学意义（F=9.769，P=0.001)，空质粒组和未转染组比较无统计学意义（P=0.230)。4、基质胶侵袭实验结果显示：重组质粒组与空质粒组和未转染组相比,细胞迁移能力减弱。转染C/EBPα组的细胞穿膜数为12±2.2，转染空质粒组的细胞穿膜数为39±3.2，未转染组的细胞穿膜数为39.6±2.6，转染重组质粒组与空质粒组和未转染组比较差异有统计学意义（F=171.00，P=0.000)，空质粒组和未转染组比较无统计学意义（P=0.731)。转染C/EBPβ组的细胞穿膜数为16±2.3，转染空质粒组的细胞穿膜数为39±3.2，未转染组的细胞穿膜数为39.6±2.6，转染重组质粒组与空质粒组和未转染组比较差异有统计学意义（F=121.785，P=0.000)，空质粒组和未转染组比较无统计学意义（P=0.731)。5、扫描电子显微镜结果显示：重组质粒组细胞表面微绒毛结构少于未转染HeLa细胞组，空质粒组细胞处于分裂状态。
　　结论：1、C/EBPα、C/EBPβ基因能抑制子宫颈癌HeLa细胞的增殖和迁移能力。

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英文缩略表

前 言

材料和方法

1 材料

2实验方法

3统计分析

结果

1.1 转染后免疫荧光显微镜观察结果

1.2免疫组织化学检测核蛋白Ki-67的表达

1.3 转染目的基因后HeLa细胞的MTT结果

1.4 基质胶侵袭实验后细胞迁移能力

1.5扫描电子显微镜下观察HeLa细胞形态

讨论

结 论

参考文献

文献综述

参考文献

致谢

作者简介

石河子大学硕士研究生学位论文