生肌调节因子在横纹肌肉瘤中的表达与DNA倍体、融合基因的相关性研究

摘要

目的:研究生肌因子(肌源性调节蛋白)在横纹肌肉瘤诊断与鉴别诊断中的作用;探索应用荧光原位杂交技术在石蜡包埋横纹肌肉瘤组织中检测融合基因PAX3-FKHR;分析生肌调节因子、DNA倍体和其它预后因子与患者生存期的关系,评估其作为横纹肌肉瘤预后因子的应用价值.材料与方法:研究对象为1983~2003年间存档的128例横纹肌肉瘤(RMS).第一部分研究中包括另外30例对照组非横纹肌源性恶性肿瘤,其中原始神经外胚层瘤、平滑肌肉瘤、滑膜肉瘤、非霍奇金淋巴瘤及恶性纤维组织性细胞瘤各6例.研究方法为组织芯片免疫组织化学染色PV<'TM>二步法,荧光原位杂交(FISH)技术、流式细胞技术(Flow cytometry).统计学方法采用x<'2>检验,计量资料采用M<'->x+s表示,生存率计算采用寿命表法,生存率的比较采用Kaplan-Meier法进行Log-rank生存分布检验.对于单因素分析有意义的变量,通过变量逐步引入的方法进入COX回归模型,从而排除变量之间的干扰因素,确立影响生存预后的独立因素.结论:生肌因子MyoD1及myogenin免疫组化染色可用于横纹肌肉瘤的诊断,特别可用于胚胎型及腺泡型横纹肌肉瘤与其它非横纹肌肉瘤的鉴别诊断,其灵敏度高,特异性好,实验有效率高.该研究自行设计的融合基因探针,结构正确,检测有效,但灵敏度尚待提高.融合基因能否用于鉴别诊断腺泡型横纹肌肉瘤,是否可以判断预后还需扩大检测样本数量进一步证实.横纹肌肉瘤的DNA倍体变化主要形式为超二倍体DNA,其次,多周期现象也很常见,提示横纹肌肉瘤为异质性高的恶性肿瘤.DNA倍体改变程度不同,以及S期细胞百分比不同作为单因素对患者的预后有一定影响,但经多因素回归分析,均不是影响横纹肌肉瘤患者预后的独立因素.能做判断横纹肌肉瘤患者预后独立指标的项目有:组织学类型、组织学分级、生肌因子MyoD1、myogenin的表达强度、P53以及CD31阳性表达等.

目录

文摘

英文文摘

前言

实验流程图

第一部分肌原调节蛋白、肌细胞生成素在横纹肌肉瘤组织芯片上的表达及其诊断价值的研究

1 材料与方法

2 结 果

3 讨 论

小 结

参考文献

第二部分融合基因PAX3一FKHR在横纹肌肉瘤中的初步检测

1 材料与方法

2 结 果

3 讨 论

小 结

参考文献

第三部分生肌因子、DNA倍体及P53等预后相关因子与横纹肌肉瘤预后的相关性研究

1 材料与方法

2 结 果

3 讨 论

小 结

参考文献

综述横纹肌肉瘤生物学特性及分子遗传学改变的研究进展

参考文献

致 谢