雌激素、吉非贝齐对载脂蛋白AⅠ基因转录调控作用的研究

摘要

目的：观察雌激素和吉非贝齐对载脂蛋白AⅠ(ApolipoproteinAⅠ，ApoAⅠ)基因转录活性和表达的影响，探讨ApoAⅠ基因启动子区域调控元件在基因转录调控中的作用和潜在机制。　　方法：在体外培养的HepG2细胞中，分别加入1，10，20，30μmol/L的雌激素或20，40，50：60μg/ml的吉非贝齐共同孵育24小时，收集细胞提取RNA及核蛋白；在HepG2细胞中加入10μmol/L雌激素或40μg/ml吉非贝齐培养1，6，24小时分别提取RNA及核蛋白。RNA采用逆转录-聚合酶链反应方法测定不同剂量及不同时间点的ApoAⅠmRNA表达。以ApoAⅠ基因启动子肝特异性增强子的A位点序列为探针，用凝胶电泳迁移率滞后实验(EMSA)，测定加入雌激素刺激的HepG2细胞核蛋白提取物与A位点的结合情况；以ApoAⅠ基因启动子-77～-45bp(drugreactionelement，DRE)序列为探针，用EMSA实验测定加入吉非贝齐刺激的HepG2细胞核蛋白提取物与DRE位点的结合情况。　　结论：(1)雌激素在转录水平调节ApoAⅠ基因表达，随着雌激素剂量的增加和刺激时间的延长，ApoAⅠ的mRNA表达水平逐渐增加，呈剂量依赖性。雌激素可能通过诱导产生的核转录因子与ApoAⅠ启动子区域的A位点结合参与基因表达调控，增加ApoAⅠ的转录，这种结合具有高度的特异性。(2)吉非贝齐同样在转录水平调节ApoAⅠ基因表达，随着吉非贝齐剂量的增加和刺激时间的延长，ApoAⅠ的mRNA表达水平也逐渐增加，同样呈剂量依赖性。吉非贝齐可能通过诱导产生的核转录因子与ApoAⅠ启动子区域的DRE位点的结合参与基因表达调控，这种结合也具有高度的特异性。

目录

摘要

前 言

材料与方法

结 果

讨 论

小 结

参考文献

载脂蛋白AI结构功能及其表达调控研究进展

致 谢