反义表皮生长因子受体对人肺癌细胞系放射敏感性影响的实验研究

摘要

目的：观察antisenseEGFR对肺腺癌细胞系的生长作用和放疗增敏作用，为临床开展放射治疗联合基因治疗提供实验依据。 方法：用免疫组化法检测EGFR高表达的肺腺癌细胞系spc-a-1。扩增并提取pcDNA3-antisenseEGFR质粒和pcDNA3空质粒，在脂质体介导下用质粒pcDNA3-antisenseEGFR转染spc-a-1细胞，并以空质粒pcDNA3转染spc-a-1细胞做对照。用G418筛选稳定表达的细胞克隆，以RT-PCR和Westernblot检测转染后EGFR的mRNA及蛋白表达抑制情况，流式细胞仪检测转染后细胞周期的变化，绘制生长曲线，评价细胞生长情况。然后分为五个实验组：未转染的细胞(正常细胞组)，单纯放疗组，单纯pcDNA3-antisenseEGFR转染组，空质粒pcDNA3转染+放疗组，pcDNA3-antisenseEGFR转染+放疗组。给予6MVX射线，800cGy剂量照射，48h后用流式细胞仪检测细胞凋亡情况，生长曲线检测细胞生长情况。 结果：转染pcDNA3-antisenseEGFR组与未转染细胞组、空载体转染组比较，EGFRmRNA和蛋白表达量明显减少，细胞生长延迟，细胞周期阻滞在G2、M期，S期细胞减少，有统计学差异(P＜0.05)，而正常细胞组和空载体转染组间无统计学差异(p＞0.05)。转染pcDNA3-antisenseEGFR+放疗组与未转染的细胞(正常细胞组)、单纯放疗组、单纯pcDNA3-antisenseEGFR转染组、空质粒pcDNA3转染+放疗组比较，细胞生长明显延迟，凋亡明显增加，有统计学差异(p＜0.01)。 结论：研究结果表明antisenseEGFR可以抑制肺癌细胞的生长，增加了肺癌细胞系spc-a-1的放疗敏感性，为进行体内实验提供了坚实的基础。

目录

学位论文原创性声明及学位论文版权使用授权书

英文缩略语

摘要

前言

材料和方法

结果

讨论

小结

参考文献

综述：EGFR靶向治疗在NSCLC中的研究进展

致谢