癌基因iASPP-SV/iASPP在乳腺癌中的表达及其与P53关系的实验研究

摘要

目的：测定iASPP、iASPP-SV在七种乳腺癌细胞系、乳腺癌及其癌旁组织中的表达，确定iASPP、iASPP-SV的相对表达量。明确p53突变与iASPP、iASPP-SV在乳腺癌细胞中的转录水平之间的关系。 方法：复苏、培养6种乳腺癌细胞系和1种正常乳腺细胞系，取得45对乳腺癌组织及其癌旁组织，行半定量RT-PCR，以β-actin为内参检测其中iASPP、iASPP-SV mRNA的含量水平；蛋白定量后行Western blot法检测iASPP、iASPP-SV的蛋白表达水平；免疫组化法检测P53蛋白表达反映P53变异情况。 结果：①在对乳腺癌细胞系、乳腺癌组织及其癌旁组织的RT-PCR实验中，我们观察到了iASPP-SV相应的电泳条带，并经测序证实该扩增产物序列完全正确；在Western blot实验中也检测到了iASPP-SV的表达；②乳腺癌患者iASPP、iASPP-SV在癌组织中的mRNA含量水平均高于癌旁组织，且iASPP与iASPP-Sv的相对mRNA含量近似且具有正相关性；③iASPP、iASPP-SV在P53染色阴性(P53野生型)乳腺癌标本的mRNA升高程度高于P53染色阳性(P53变异型)乳腺癌标本；④iASPP、iASPP-SV在P53染色阴性(P53野生型)患者乳腺癌组织中的mRNA含量水平高于癌旁组织，在P53染色阳性(P53变异型)患者乳腺癌组织中二者的mRNA含量水平也高于癌旁组织；⑤未发现iASPP、iASPP-SVmRNA含量与乳腺癌临床分期、病理分型的相关性。 结论：①在mRNA和蛋白水平上证实了iASPP、iASPP-SV在7种细胞系和乳腺癌中的表达；②iASPP、iASPP-SV可能与乳腺癌的癌变过程相关，且iASPP-SV与iASPP的mRNA含量水平具有正相关性；③同iASPP一样，iASPP-SV可能主要通过P53途径在乳腺癌中发挥作用；④iASPP、iASPP-SV也可能通过非P53途径与乳腺癌的发生相关；⑤iASPP、iASPP-SV与乳腺癌的临床分期、病理分型无关。

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