实验性变态反应性神经炎的全血灌流治疗的实验研究

摘要

目的：探讨MMP-9、NOS-2在实验性变态反应性神经炎中的作用及全血灌流吸附法的治疗效果。 方法：用新鲜牛坐骨神经提取MBP借以Wister大鼠建立GBS的动物模型EAN。分别在症状初现期、高峰期、恢复期对EAN及对照组大鼠进行临床评分，取坐骨神经进行HE、丽春红G-亮绿SF染色和免疫组化以观察T细胞和髓鞘的病变，MMP-9、NOS-2的表达。正常大鼠及免疫后第15天的EAN大鼠检测其坐骨神经的传导速度。分别给予免疫后第13天的EAN大鼠以NS或全血灌流吸附治疗，对两组大鼠进行临床评分，在免疫后第18天进行病理、肌电图及MMP-9的检测。 结果：经SDS-PAGE电泳鉴定，提纯的MBP主要成分位于14,000-30,000之间，分别为P2、P1、P0，用Folin-酚法测定蛋白(直接法/London法)浓度为7/20mg/ml，100g牛坐骨神经共得蛋白约200mg，MBP约占1/3-1/2。用MBP成功建立了EAN动物模型，实验组的大鼠大多于免疫后第7-9天出现症状，第13-18天疾病达到高峰，最高评分为10-12分，第22-25天症状开始好转；对照组大鼠未见明显异常。症状初现期、高峰期、恢复期的EAN大鼠和对照组大鼠的T细胞数分别为8.5±1.06、12.8±1.04、5.12±1.45、0.0±0.00，3组EAN大鼠与对照组相比较均具有统计学意义，Masson染色显示变性的髓鞘呈半环状，有的不着色，呈空白区，到达高峰期时，约1/2-3/4神经脱髓鞘。肌电图也显示传导速度明显降低，潜伏期明显延长。3组的EAN大鼠和对照组大鼠的MMP-9表达的位置是血管内皮细胞和雪旺细胞，个数分别是5.62±0.32，8.69±0.55，3.5±1.00，2.0±0.82，EAN三组分别与对照组相比，前两组有意义，而恢复期无意义。表达NOS-2的阳性细胞主要是T细胞。进行全血灌流吸附的EAN大鼠在免疫后第18-20天，大鼠体重可恢复到治疗前状态，而到第22-24天时与正常大鼠无异；免疫后第18天T细胞数为7.58±0.80，与EAN组比较具有统计学意义：脱髓鞘的比例约在30％左右，好于EAN组；传导速度也要快于EAN组。 结论：MBP可成功建立EAN模型；在EAN中，MMP-9在血—神经屏障的破坏和髓鞘降解的过程中起作用。全血灌流(色氨酸吸附柱)对治疗EAN大鼠有效。

目录

文摘

英文文摘

论文说明：符号说明

声明

前言

研究现状、成果

研究目的、方法

第一部分 MBP的提取

一、实验材料和方法

二、实验结果

三、讨论

四、小结

第二部分 EAN动物模型的建立

一、实验材料和方法

二、结果

三、讨论

四、小结

第三部分 全血灌流吸附法治疗EAN

一、实验材料和方法

二、结果

三、讨论

四、小结

结论

参考文献

发表论文和参加科研情况说明

附录

综述 格林-巴利综合征的治疗

致谢