沙眼衣原体临床株的分离培养及药物敏感性研究

摘要

沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis，Ct)是目前国内外最常见的性病病原体之一。泌尿生殖道Ct感染，是世界范围内最常见的性传播疾病之一，其发病率在许多国家位居性传播疾病的首位，可引起多种疾病和并发症，并给患者带来严重的心理负担。据世界卫生组织估计，每年约有9300万新发病例，给社会造成严重的经济负担。在美国，泌尿生殖道Ct感染的发病率已超过淋病。每年大约有400万美国人受感染。在我国，泌尿生殖道Ct感染的发病率亦呈逐年上升趋势，泌尿生殖道Ct感染已经成为一个危害极大的公共健康问题。 治疗Ct感染的主要药物是抗菌药，以往认为抗菌药有较高的治愈率，但目前临床治疗Ct感染失败的报道愈来愈多。治疗失败不仅与病人年龄、治疗期间性交活动致再感染有关，而且也和患者依从性、药物生物利用度、Ct载量等因素有关。而更为重要的是耐药Ct不仅常导致治疗失败，甚至形成持续感染状态，造成感染长期不愈。Ct抗菌药敏感性试验始于20世纪70年代，至今虽然已经发展了许多药敏检测方法，但是由于Ct生长周期长、培养要求高、影响因素多等特点，药敏试验多比较繁琐、耗时，至今尚无一种公认的标准方法可以用于测定Ct体外药物敏感性。 目的:通过McCoy细胞培养法分离得到Ct临床株，并用10种常用抗菌药测定Ct的体外敏感性，了解本地区性病门诊Ct药敏情况，并探讨Ct药物敏感性的变迁及临床疗效与实验结果的关系。为耐药机制的研究筛查耐药菌株。并保留Ct临床株，为进一步深入研究奠定基础。 方法:收集了2006年3月-2008年3月期间到天津市性传播疾病研究所门诊就诊患者的尿道或宫颈拭子148例，所有患者均符合采集标准，并记录其临床相关资料。试验以Ct E型标准株培养为基础，采用McCoy细胞对临床标本进行培养，所有临床株进行五代盲传培养，对阳性标本继续传代培养。感染率达90％的阳性标本扩大标本量并冻存于-80℃冰箱中备用。利用96孔板采用倍比稀释法测定Ct的药物敏感性。先确定能引起90％以上细胞感染的Ct接种量；然后在96孔板中制备致密单层细胞，按接种量加入Ct菌液，离心、去上清、加入含不同浓度抗菌药的衣原体感染液，并设立阴性、阳性对照，同前条件孵育48小时后，碘染色后镜下观察结果。镜下观察未见有Ct包涵体形成的最小稀释浓度即为最低抑菌浓度(Minimal inhibitory concentration，MIC)。 结果:培养临床标本148例共得到38例阳性临床株，阳性率约为25.68％。其中感染率达90％以上的标本有32株。32株标本药敏MIC(单位均为μg/ml)：红霉素：0.25～2；克拉霉素：0.004～0.032；阿奇霉素：0.25～1；四环素：0.079～0.625；多西环素：0.016～0.125；米诺环素：0.008～0.064；左氧氟沙星：0.125～1；莫西沙星：0.03～0.24；司帕沙星：0.016～0.128；利福平：0.008～0.03。试验筛查到6株红霉素耐药菌株。 结论:1、接种前离心和盲传能明显提高Ct临床株培养的阳性率。2、筛查到6株红霉素耐药菌株，反映了天津地区临床上已经出现Ct对红霉素的耐药，也为耐药机制的研究奠定了基础。3、药敏试验结果和临床疗效存在一定差异。4、保留下Ct阳性临床菌株，为Ct其它方面的研究打下基础。

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结果

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小结

结论

参考文献

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综述 沙眼衣原体对喹诺酮类耐药机制的进展

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